Analiza jakościowa zapalenia wątroby typu C

8 marca 2017, 12:29 Artykuły eksperckie: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10 547

Analiza jakościowa reakcji łańcuchowej polimerazy - PCR dla zapalenia wątroby typu C określa obecność lub brak HCV w organizmie. W warunkach laboratoryjnych bada się strukturę RNA, która obejmuje wirusa. W przypadku wykrycia wirusa C konieczne jest przeprowadzenie leczenia, ponieważ zaniedbany stan wątroby spowoduje poważne konsekwencje. PCR wysokiej jakości przeprowadza się po odzyskaniu, aby potwierdzić brak przeciwciał. Powołany i do rutynowej kontroli. Przy niskim stężeniu czynnika sprawczego we krwi, PCR (jakościowy) może niczego nie wykryć, ponieważ system diagnostyczny ma własne progi czułości. W przypadku początkowej fazy choroby lub łagodnej postaci PCR przeprowadza się za pomocą ultradiagnostyki na ultraczułym sprzęcie.

Co to jest wirus RNA?

Termin RNA wirusa zapalenia wątroby typu C (lub RNA wirusa zapalenia wątroby typu C) jest chorobą wątroby. Wirus C wiąże się ze zdrową komórką ciała, penetrując do środka. Z biegiem czasu, rozprzestrzeniając się po całym ciele, konieczne jest tylko dostanie się do krwi. W rezultacie patogen przenika do wątroby, łączy się z komórkami i ciężko pracuje. Komórki wątrobowe (hepatocyty) działają pod jego wpływem, ulegają zmianom i z tego powodu umierają. Im dłużej wirus C znajduje się w wątrobie, tym większa liczba komórek umiera. Z czasem rozwijają się niebezpieczne choroby, prowadzące do złośliwej degeneracji i śmierci.

Zakażenie wątroby tym typem wirusa może nie objawiać się zewnętrznie. Przez wiele lat lub dziesięcioleci zakażona osoba czuje się całkowicie zdrowa, a tylko przypadkowe badanie ujawnia patologię. Przy oddawaniu krwi na zapalenie wątroby badana jest część łańcucha RNA (kwasu rybonukleinowego), który jest częścią ludzkiego genu (DNA). Wyniki badań laboratoryjnych nie powinny być wykorzystywane do samoleczenia, ponieważ jest to tylko wskaźnik. Dokładny obraz i dalsza diagnoza są lepiej określone przez lekarza.

Po zakończeniu: wskazania do badań

W potwierdzeniu HCV przeprowadza się analizę PCR (reakcja łańcuchowa polimerazy). Badania PCR pomagają znaleźć czynnik sprawczy w strukturze RNA i zalecają skuteczną terapię. Wyznaczony w następujących przypadkach:

  • wykrywanie objawów zapalenia wątroby;
  • badania przesiewowe w celu zapobiegania;
  • badanie osób mających kontakt;
  • diagnoza zapalenia wątroby o mieszanym pochodzeniu (oznaczanie głównego patogenu);
  • określenie poziomu aktywności reprodukcyjnej wirusa w postaci przewlekłej;
  • marskość wątroby;
  • określić skuteczność przepisanego leczenia.
Badanie PCR zaleca lekarzowi określenie skuteczności leczenia zapalenia wątroby.

Istnieje jakościowa i ilościowa analiza PCR. Ilościowa PCR pokazuje procent RNA z nosicielami wirusa we krwi, a jakość wskazuje na obecność lub nieobecność wirusa. Pozytywny wskaźnik jakości (obecność RNA wirusa zapalenia wątroby typu C) również wymaga badań ilościowych. Wysoki poziom stężenia czynnika wywołującego wirusowe zapalenie wątroby typu C wiąże się z ryzykiem jego przeniesienia, czyli zakażenia innych. Niskie liczby są lepsze do leczenia. Ilość wirusów RNA we krwi nie jest związana z intensywnością choroby. Analiza PCR jest również przeprowadzana w przypadku terapii interferonem w celu określenia czasu trwania i złożoności przebiegu leczenia.

Cechy wysokiej jakości analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

Analizie jakościowej przypisuje się wskaźnik reakcji łańcuchowej polimerazy dla wszystkich pacjentów, którzy mają we krwi przeciwciała przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C. Ci, którzy byli chorzy i wyzdrowieni, muszą ponownie przystąpić do testu. Zaleca się zaliczenie testu na wirusowe zapalenie wątroby typu B, a następnie, w przypadku pozytywnego wyniku, i na wirusowe zapalenie wątroby typu D. Również jakościowo analizowana reakcja powinna być przeprowadzona w połączeniu z innymi badaniami krwi. Analizy pokażą pełny obraz rozprzestrzeniania się wirusa.

Z wyników testu wynika, że ​​tylko pozytywny wynik testu na wirusowe zapalenie wątroby typu C będzie widoczny lub negatywny, czyli obecność lub brak wirusa. Jeśli dane wyjściowe są „wykrywane”, wirus jest i nadal jest aktywny. Oznaczenie „nie wykryto” wskazuje na brak wirusa lub jego niewielką ilość. Przy tym wskaźniku należy pamiętać, że czułość analityczna systemów diagnostycznych jest różna i że wirusowe zapalenie wątroby typu C może nadal znajdować się we krwi, ale nie przejawia się w analizie.

Szczególnie wrażliwa metoda PCR ujawnia ultra hepatitis C nawet w niewielkich ilościach. Stosuje się badanie hybrydyzacji fluorescencyjnej, które jest wielokrotnie wyższe niż standardowe systemy PCR. Metoda jest stosowana w kilku przypadkach:

  • podejrzewane ukryte formy wirusowego zapalenia wątroby typu C;
  • Diagnostyka PCR nie potwierdziła patogenu, ale istnieją przeciwciała;
  • w przypadku odzyskiwania;
  • wykryć wczesne zakażenie.
Powrót do spisu treści

Analiza dekodowania

Dekodowanie PCR HCV wpływa na ostateczną decyzję podczas diagnozy, w szczególności metodą ultrametodową. Główną wadą tego badania jest ścisłe przestrzeganie sterylnych warunków dla próbki i materiałów. Nieznaczne odchylenie czasami pokazuje niedokładne wnioski analityczne, komplikuje diagnozę i późniejsze leczenie. Analiza PCR w celu określenia zapalenia wątroby RNA nie zawsze z pewnością pokazuje obraz choroby, czasami dopuszcza się niedokładności iw obu kierunkach.

Diagnozowanie wirusa zapalenia wątroby zaleca się przeprowadzenie kompleksowego badania.

Norma wskaźników

Brak przeciwciał JgM przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C w wynikach badania jest uważany za normę w analizie reakcji łańcuchowej polimerazy. Jednocześnie wyniki analizy serologicznej wskazują na obecność przeciwciał przeciwko wirusowi C i jest to również w normalnym zakresie. Definicja jakościowa nie pokazuje intensywności choroby, ujawnia jedynie czynnik sprawczy wirusowego zapalenia wątroby typu C w RNA. Ta analiza jest powtarzana po zabiegu, aby potwierdzić faktyczny powrót do zdrowia.

Odchylenia

Jeśli obecne są przeciwciała JgM na RNA HCV, wskazuje to na rozwijającą się infekcję. Choroba w tym samym czasie postępuje ostro lub chronicznie, objawia się w różnych stadiach. Jeśli odnotowano spadek liczby przeciwciał, analiza wskaże, że wyniki leczenia zostały osiągnięte podczas powrotu do zdrowia. Istnieją niezwykle rzadkie przypadki fałszywie dodatnich wyników w diagnostyce. Występują u kobiet w czasie ciąży iu osób z innymi chorobami zakaźnymi.

Diagnostyka PCR na zapalenie wątroby typu C

Wirusowe zapalenie wątroby typu C jest stanem zapalnym komórek wątroby, który powstaje w wyniku zakażenia wirusem HCV (wirusowym zapaleniem wątroby typu C) poprzez kontakt z krwią osoby zakażonej. Kod genetyczny flawiwirusa HCV jest przenoszony przez cząsteczkę RNA (kwas rybonukleinowy) zawartą w strukturze wirusa. To zagrażające życiu zjawisko wyróżnia się tajemnicą na początkowym etapie patologii. Odstęp czasu między zakażeniem a wystąpieniem objawów (odpowiedź układu odpornościowego) może wynosić od jednego miesiąca do sześciu miesięcy. Z reguły choroba przyjmuje postać przewlekłą i jest trudna do wyleczenia.

Współczesna medycyna pozwala zdiagnozować patologię z niewielkim uszkodzeniem wątroby. Najbardziej powszechne i skuteczne metody diagnostyczne obejmują analizę PCR. Rozważ w tym artykule, co to jest i jakie istnieją.

Jakie jest badanie

Analiza PCR dla zapalenia wątroby typu C jest badaniem laboratoryjnym wykrywającym flawirus, materiał genetyczny kwasu rybonukleinowego (RNA). Określa liczbę cząsteczek RNA we krwi, jakość materiału biologicznego, typ genetyczny wirusa HCV.

Metoda PCR na wirusowe zapalenie wątroby typu C umożliwia wykrycie minimalnej ilości flawirusa przed utworzeniem przeciwciał, co do zasady, wkrótce po zakażeniu.

Badanie jest często określane jako analiza RNA, ponieważ wykrywa cząsteczki kwasu rybonukleinowego o wielkości 30-60 nm zawarte w flawawirusie.

Badanie przeprowadza się w następujący sposób: na pusty żołądek pacjent podaje krew z żyły, która jest następnie testowana różnymi metodami:

  • PCR w czasie rzeczywistym jest przeprowadzany w sposób zamknięty w sposób zautomatyzowany i ma niższy limit wykrywania wirusa RNA, równy 15 IU / ml;
  • COBAS AMPLICOR o czułości 50-100 IU / ml.

Im wyższy próg czułości techniki diagnostycznej, tym większe szanse na znalezienie najniższej zawartości wirusa w badanym materiale biologicznym.

Jakie rodzaje analizy używają

Analiza, która była z powodzeniem stosowana przez kilka dziesięcioleci, nazywana jest zapaleniem wątroby typu PCR, i można ją wykryć dość łatwo i szybko. W medycynie istnieją dwie metody reakcji, zasadniczo różne od siebie:

  • metoda jakościowa ujawnia obecność w materiale biologicznym źródła genetycznego określonego wirusa;
  • analiza ilościowa mierzy liczbę materii genetycznej, co pozwala określić etap patologii lub ocenić skuteczność kursu terapeutycznego;
  • Genotypowanie określa rodzaj wirusa obecnego w organizmie.

Ogólnie rzecz biorąc, badanie krwi pomaga zidentyfikować naturę wiremii i rodzaj genetyczny patogenu. Z reguły badania przeprowadza się 1 raz w zależności od stopnia czułości systemu diagnostycznego. Jeśli to konieczne, ponowne badanie przeprowadza się przy użyciu odczynnika ultraczułego.

Wysokiej jakości PCR

Co to jest wysokiej jakości RNA PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C? Istota reakcji polega na obecności sekwencji RNA zapalenia wątroby, a reakcja jest możliwa tylko w obecności białek wirusowych o podobnej etymologii w teście ELISA. W procesie porównywania wykrywa się obciążenie i możliwe uszkodzenie obszaru wątroby.

Charakterystyczną cechą tej metody jest zdolność do wykrywania nawet obecności oddzielnego genu.

Należy zauważyć, że po otrzymaniu wyników testów PCR i ELISA pacjent wymaga odpowiedniego leczenia, niezależnie od ostatecznego wyniku testu immunologicznego. Pozytywny wskazuje na infekcję, a negatywny PCR wskazuje na zmniejszoną liczbę cząstek wirusowych w stosunku do poziomu czułości.

Istnieje kilka warunków, które wpływają na produkcję negatywnej reakcji PCR i ELISA:

  • brak odpowiednich warunków odbioru materiałów;
  • wynikowa analiza zawiera zanieczyszczenie;
  • w przypadku wczesnego wstrzyknięcia heparyny pacjentowi.

Pacjent nie musi przestrzegać pewnych zasad pobierania próbek krwi do analizy PCR, w tym przypadku jakość tej analizy zależy od lekarza wykonującego zabieg. Zdolność do ustalenia obecności choroby (zwłaszcza w postaci ostrej) pojawia się w ciągu kilku tygodni po zakażeniu.

Analiza ilościowa

Zaleca się test ilościowy do wykrywania obciążenia wirusowego bezpośrednio przed utworzeniem dalszej terapii i reakcją organizmu. Proces pobierania krwi odbywa się w podobny sposób, jak przy wysokiej jakości PCR i ELISA, jedynym warunkiem jest brak możliwości palenia pacjenta przed zabiegiem.

W odniesieniu do cech uzyskanych z badania danych, zwiększone obciążenie charakteryzuje się wskaźnikami od 800000 IU / ml, niskie - 400000 IU / ml. Obecność wirusa w ciele pacjenta jest wskazana przez PCR dla zapalenia wątroby nie jest negatywnym testem jakościowym.

Ten rodzaj badań pozwala określić, jak niebezpieczny jest pacjent dla otaczających go ludzi. Na przykład identyfikacja wysokiego poziomu wskazuje na zwiększoną zakaźność pacjenta. Ponadto wyniki analizy pomagają sformułować dalsze najskuteczniejsze leczenie i określić, ile istniejącej terapii uważa się za skuteczną.

Szybka negatywna reakcja testów wskazuje na powodzenie wybranej techniki, a powolna wskazuje na potrzebę dostosowania i zastosowania leczenia wieloaspektowego.

Proces przyjmowania procedury analizy zależy od konkretnego dnia przebiegu choroby. Pierwsze oznaczenie wykonuje się pierwszego dnia po przyjęciu pacjenta do szpitala, a następnie procedurę powtarza się po 4, 12 i 24 tygodniach po przyjęciu leków.

Tak więc analiza ilościowa pokazuje, które leczenie jest najskuteczniejsze, czas trwania dostępnej terapii i niebezpieczeństwo pacjenta w stosunku do innych osób.

Genotypowanie

W badaniu analizy materiału ważne jest określenie dokładności genotypu wirusa, który ma miejsce. Obecnie istnieje 11 odmian wirusa zapalenia wątroby typu C, które z kolei obejmują pewne podgatunki.

Wszystkie te gatunki różnie reagują na różne zabiegi, a poszczególne odmiany są całkowicie odporne na wiele leków.

Genotyp umożliwia określenie i pokazanie stanu wątroby. Nie jest niczym niezwykłym, że wyniki nie są „wpisywane” w wynikach, co oznacza, że ​​wirus we krwi pacjenta nie jest wykrywany przez ten system testowy. Można to wykryć, jeśli dany genotyp nie pasuje do tej strefy. W takiej sytuacji analiza jest powtarzana, a do badania materiału używany jest bardziej czuły system.

Metoda Ultra Sensitive

Metoda ultraczuła jest niezbędna w niektórych przypadkach, gdy diagnozy zapalenia wątroby nie można przeprowadzić innymi metodami, a kiedy wykonać analizę, decyduje lekarz prowadzący:

  • jeśli podejrzewasz obecność wirusa zapalenia wątroby typu C u pacjentów z ukrytą odmianą choroby;
  • obecność przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C, nie potwierdzonych przez diagnostykę PCR;
  • w celu określenia jakości skuteczności wybranej metody leczenia i potwierdzenia eliminacji choroby.

Czułość tej metody jest znacznie wyższa niż powszechnie stosowana, jednak metoda ta nie wyklucza uzyskiwania fałszywych wyników, zarówno pozytywnych, jak i negatywnych. W takiej sytuacji ważne jest kontrolowanie jakości procedury i możliwości zanieczyszczenia samego materiału.

Wyjaśnienie analizy PCR

Dekodowanie analizy odbywa się na podstawie prezentowanych materiałów, natomiast wyniki badań laboratoryjnych zawierają pewne dane opisane powyżej.

Transkrypt może zawierać pozytywną reakcję łańcuchową polimerazy PCR i ujemny test ELISA w teście, co oznacza, że ​​pacjent nie ma żadnych objawów zapalenia wątroby typu C we krwi, ale w przeszłości przeniósł ostrą postać choroby. Z reguły przy diagnozowaniu specjaliści korzystają z wskaźników testowych PCR.

Podsumowując powyższe, można stwierdzić, że w trakcie analizy ważne jest przestrzeganie wszystkich zasad i zaleceń, aby uzyskane wyniki były jak najdokładniejsze, a na podstawie uzyskanych danych można określić skuteczność zastosowanej terapii i dalszą szansę pełnego wyzdrowienia.

Przeprowadzenie analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C i dekodowanie wyników

Analiza wirusowego zapalenia wątroby typu C to badanie, którego głównym celem jest identyfikacja materiału genetycznego czynnika sprawczego. Analiza ujawnia czynnik wywołujący chorobę za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy. Diagnoza ta charakteryzuje się wysokim stopniem dokładności, specyficzności w celu wykrycia nieobecności lub obecności infekcji wirusowej.

Istota diagnozy

W celu przeprowadzenia analizy PCR w celu określenia wirusa zapalenia wątroby typu C od pacjenta pobierana jest krew żylna, która potencjalnie zawiera HCV RNA (kwas rybonukleinowy) pożądanego wirusa.

Test PCR na zapalenie wątroby typu C implikuje procedurę dodawania do cząstek krwi pacjenta:

  • startery (krótkie sztucznie zsyntetyzowane regiony niezbędnego genu);
  • specjalny enzym (polimeraza RNA).

Po pobraniu próbki materiał biologiczny jest wysyłany do badań do laboratorium. Jedna porcja krwi jest potrzebna do bezpośredniej analizy PCR, druga jest wysyłana do badania metodą ELISA. Enzym jest w stanie w krótkim czasie zwiększyć liczbę materiału genetycznego wirusa patogenu. W specjalnym urządzeniu przeprowadza się kilka cykli procesów ogrzewania i chłodzenia. Na ostatnim etapie uzyskany materiał porównuje się z genami wirusa i wyciąga wniosek o obecności lub braku patologii w ciele pacjenta.

Istota i przebieg analizy PCR w laboratorium. Nakręcony przez SiberianMedicalLaboratory.

Rodzaje badań

Istnieją 3 rodzaje diagnostyki, które umożliwiają określenie obecności wirusa zapalenia wątroby typu C w organizmie człowieka:

  • genotypowanie;
  • jakość;
  • ilościowy.

Metoda jakościowa

Rozpoznanie zapalenia wątroby typu C metodą jakościową ma zastosowanie u pacjentów, u których wykryto przeciwciała przeciwko wirusowi w badaniu krwi. W przypadku obecności ostrej fazy HCV RNA, takie pomiary diagnostyczne mogą określić obecność choroby w ciągu 1-2 tygodni po zakażeniu. W tym okresie nie można jeszcze opracować przeciwciał przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C.

Metoda ilościowa

Ilościowa metoda diagnostyczna jest stosowana do określenia stężenia wirusa w próbkach krwi. Taki test wiremii (stopień koncentracji) umożliwia dokładne określenie liczby jednostek wirusowego RNA. Wynik końcowy jest wyrażony w odpowiedniej objętości. Jeśli mówimy o analizie ilościowej, wskaźniki mierzy się w 1 ml (1 m3 Cm).

Parametr obciążenia wirusem oznacza poziom zakaźności choroby, to znaczy odzwierciedla stopień „zakaźności” pacjenta. W praktyce oznacza to, że im wyższe jest stężenie wirusa we krwi, tym większe są szanse na zakażenie pacjenta wirusem zapalenia wątroby typu C. Metoda badania ilościowego pozwala również ustalić jakość i skuteczność leczenia.

Genotypowanie

Genotypowanie ujawnia mutacje czynnika wywołującego chorobę. Przed przepisaniem planu leczenia określa się genotyp wirusa: od tego zależy jakość i czas trwania terapii. Na przykład w leczeniu choroby typu I sprawność wynosi 60%, w przypadku II, III - około 80%.

Zalety analizy zapalenia wątroby typu PCR

Do głównych zalet procedury należą:

  1. Możliwość wczesnej diagnozy. Analiza PCR jest w stanie wykryć obecność wirusa we wczesnych stadiach zakażenia.
  2. Niski wynik błędu. Badany zasób biologiczny pozwala zdiagnozować fragment materiału genetycznego, który jest charakterystyczny tylko dla jednego rodzaju zakażenia wirusowego. Ta okoliczność pozwala zapobiec fałszywym wynikom diagnostycznym.
  3. Wysoki stopień czułości. Analiza PCR jest w stanie wykryć RNA wirusa w małych ilościach, co również umożliwia śledzenie utajonych infekcji w czasie.

Wskazania dla

Konieczne jest przeprowadzenie testu PCR na zapalenie wątroby typu C, jeśli jest dostępne:

  • kontakt z chorymi ludźmi, co może prowadzić do zakażenia;
  • objawy marskości wątroby (powiększenie śledziony, nietypowe zmiany w wielkości wątroby, wykrycie splotu żylnego na brzuchu pod skórą);
  • pozytywne wyniki testu ELISA;
  • zwiększona aktywność AST i ALT (przejawiająca się w analizie biochemicznej krwi);
  • potrzeba kontrolowania przebiegu terapii przeciwwirusowej;
  • początkowy etap leczenia potrzeby ustalenia obciążenia wirusem;
  • przeprowadzenie ostatniego etapu terapii w celu wykluczenia możliwych nawrotów;
  • pacjent ma wirusowe zapalenie wątroby typu B, aby wykluczyć rozwój mieszanego uszkodzenia wątroby.

Jak przygotować się do oddawania krwi do badań PCR

Przygotowanie do analizy PCR obejmuje następujące zalecenia:

  • krew jest pobierana rano;
  • analiza jest przeprowadzana na pusty żołądek, dlatego zaleca się przerwę między ostatnim spożyciem 8-10 godzin;
  • kilka dni przed diagnozą należy wykluczyć tłuste, pikantne i smażone potrawy, napoje alkoholowe i palenie;
  • jeden dzień przed analizą należy powstrzymać się od ciężkiego wysiłku fizycznego, wykluczyć zajęcia na siłowni lub basenie.

Wyniki analizy: normy i odchylenia

Sama analiza nie jest długotrwała, a wysoko wykwalifikowany specjalista hepatolog lub specjalista chorób zakaźnych odszyfrowuje wyniki PCR dla zapalenia wątroby typu C. Na podstawie wyników analizy diagnozuje się pacjenta.

Aby poprawnie rozszyfrować wyniki ankiety, biorą pod uwagę wskaźniki:

  • analiza biochemiczna krwi;
  • dane ultradźwiękowe;
  • wyniki biopsji.

Interpretacja analizy ilościowej

Po uzyskaniu wyników analizy ilościowej PCR brane są pod uwagę następujące wskaźniki:

Diagnoza za pomocą PCR dla zapalenia wątroby typu C

Nie wszyscy wiedzą, dlaczego stosują metodę diagnostyczną PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C. Jedną z najczęstszych grup chorób są choroby zakaźne przewodu pokarmowego. Najczęściej dotyczy to żołądka (wrzody), jelit (zapalenie okrężnicy, zapalenie jelit) i wątroby (zapalenie wątroby).

Spośród wszystkich wymienionych powyżej organów największy ciężar nałożony jest na wątrobę. W organizmie niezwykle ważna jest rola wątroby:

  1. Prawie wszystkie reakcje metaboliczne zachodzą w wątrobie (w tym miejscu powstają wszystkie istotne składniki, które pozwalają organizmowi w pełni funkcjonować).
  2. Wątroba jest głównym organem detoksykacyjnym. Z jego pomocą (w szczególności poprzez żółć) usuwa się wiele substratów, które mogą powodować zatrucie i prowadzić do poważnych konsekwencji.

Niestety, wiele osób nie monitoruje swojego zdrowia, dlatego wątroba zaczyna cierpieć. Zazwyczaj rozwija się zapalenie wątroby o różnej etiologii (wirusowej, toksycznej).

Definicja zapalenia wątroby

Wirusowe zapalenie wątroby zajmuje ważne miejsce wśród chorób wątroby. Ciężkość przebiegu choroby, złożoność leczenia stawiają je na pierwszym miejscu wśród patologii innej natury tego narządu.

Wszystkie zapalenie wątroby dzieli się na ostre i przewlekłe. Wirusowe zapalenie wątroby typu A i B klasyfikuje się jako ostre, w przewlekłym zapaleniu wątroby typu C pierwsze miejsce.

Choroba ta jest wywoływana przez wirus zapalenia wątroby typu C. Charakterystyczną cechą jest to, że choroba może trwać przez długi czas bez żadnych objawów klinicznych.

Przenosi się głównie przez krew. Wraz z przepływem krwi wirus dostaje się do wątroby, gdzie zaczyna się namnażać w komórkach. W wyniku akumulacji wirionów następuje zniszczenie zakażonego hepatocytu. W odpowiedzi na to zaczynają powstawać przeciwciała, które zaczynają atakować resztki hepatocytów. Z tego powodu z czasem rozwija się pula przeciwko komórkom wątroby, która pogarsza przebieg choroby.

Ze względu na to, że choroba jest łagodna bezobjawowo lub bezobjawowo, a objawy kliniczne pojawiają się tylko wtedy, gdy komórki są znacząco dotknięte, choroba ta wymaga stworzenia metod diagnostycznych w celu wykrycia jej obecności i podjęcia odpowiednich środków.

Diagnoza zapalenia wątroby typu C: analizy jakościowe i ilościowe

Obecnie do diagnozy zapalenia wątroby typu C stosuje się takie metody, jak biopsja wątroby i immunogram.

Pozwalają one bezpośrednio określić obecność zakażonych hepatocytów (próbki biopsji wątroby) lub swoistych przeciwciał przeciwko zaatakowanym komórkom (immunogram). Istnieje jednak metoda, która pozwala wiarygodnie określić obecność samego wirusa. Jest to reakcja łańcuchowa polimerazy PCR.

Istota tej metody polega na tym, że w pewnych warunkach zachodzi produkcja łańcuchów RNA. Wynika to z faktu, że we krwi znajdują się fragmenty cząsteczki wirusa lub biopsja. Podczas łączenia ich z niektórymi cząsteczkami w podłożu następuje synteza łańcuchów komplementarnych do wirusowego RNA. W późniejszej analizie i porównaniu ze znaną sekwencją nukleotydową wirusa zapalenia wątroby typu C możliwe jest określenie, czy wirus jest obecny w organizmie i czy występuje uszkodzenie wątroby.

PCR przeprowadza się po wykryciu swoistych przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby we krwi. Po przeprowadzeniu testu wynik - RNA zostaje „wykryty” lub „nie wykryty”. Czasami może powiedzieć „za mało materiału” - w tym przypadku konieczne jest ponowne przebadanie w kierunku wirusowego zapalenia wątroby typu C.

Jeśli liczba cząstek wirusowych jest mniejsza niż wymagana ilość minimalna, to możemy powiedzieć, że nie ma zapalenia wątroby, a minimalne ilości materiału genetycznego mogą być „zmieszane” z powodu naśladowania materiału genetycznego lub niektórych sekwencji nukleotydowych, które mogą pokrywać się z wirusem.

  1. W przypadku PCR można zaobserwować negatywny wynik, gdy rzeczywiście występują cząsteczki wirusa we krwi, ale są one tak małe (niedawno pojawiła się infekcja lub analiza była poprzedzona długotrwałą i intensywną terapią antywirusową), że system testowy po prostu nie mógł normalnie określić ich stężenia. RNA - „nie wykryto”.
  2. Jeśli wynik PCR daje wynik pozytywny, we krwi jest tak wiele cząstek wirusa, że ​​ich liczba przekracza dolny próg czułości systemu testowego. W tym przypadku istnieje wysokie ryzyko rozwoju procesu zakaźnego (lub jest on już obecny w dość zaawansowanym stadium). Zazwyczaj duża ilość wirusa jest już wskazaniem do leczenia i późniejszego przeszczepu wątroby.

Czasami test może stać się fałszywie dodatni lub fałszywie ujemny.

Fałszywie ujemny wynik PCR zapalenia wątroby obserwuje się w przypadku, gdy niektóre składniki są obecne w ośrodku reakcji, które hamują tworzenie kopii cząstki wirusa. Z tego powodu nie jest możliwe uzyskanie prawdziwego obrazu stanu krwi, który przyczynia się do przejścia wirusa i postępu choroby. Obecność heparyny we krwi może również wpływać na reakcję (przez zmniejszenie względnej lepkości krwi). Nieprawidłowa interpretacja analizy jest możliwa nawet wtedy, gdy warunki transportu i przechowywania badanego materiału nie zostały spełnione.

Wyniki fałszywie dodatnie, w przypadku rozpoznania zapalenia wątroby typu C, najczęściej powstaje reakcja PCR, gdy probówka lub środowisko pracy są zanieczyszczone. Ponadto można zaobserwować pozytywne wyniki w obecności wirusów zapalenia wątroby innych grup (z powodu reakcji krzyżowej).

Jakościowa analiza PCR w celu wykrycia zapalenia wątroby typu C

Obecność we krwi dużej liczby krioglobulin również bezpośrednio wpływa na przebieg reakcji PCR. Z tego powodu konieczne jest określenie ich stężenia we krwi przed badaniem na wirusowe zapalenie wątroby typu C w celu wykrycia wcześniejszego zniekształcenia wyniku i zapobieżenia temu.

Po tych testach staje się jasne, czy we krwi znajdują się cząstki wirusowe. Przy ich określaniu zaleca się natychmiastowe rozpoczęcie leczenia przeciwwirusowego w celu spowolnienia postępu procesu. W przeciwieństwie do wirusowego zapalenia wątroby typu B, nie ma całkowitego wyleczenia zapalenia wątroby typu C; choroba przechodzi tylko w etap utajony i zaczyna postępować wolniej. Uszkodzenie wątroby jest nieuniknione. Na ostatnim etapie procesu, gdy wątroba nie może już poradzić sobie z funkcją, może wymagać jej przeszczepienia.

Leczenie odbywa się głównie za pomocą dwóch leków - interferonu i rybawiryny.

Udowodniono ich skuteczność w spowalnianiu procesu pokonywania hepatocytów. Po drodze terapia infuzyjna jest koniecznie zalecana, aby ułatwić pracę wątroby.

Wszyscy pacjenci, u których zaobserwowano wzrost liczby cząstek wirusowych we krwi, muszą być zarejestrowani u hepatologa. Kilka razy w roku zaleca się przeprowadzenie badania profilaktycznego w celu określenia postępu procesu i terminowego wykrycia wskazań do przeszczepu. Ponadto możliwe jest stosowanie hepatoprotektorów, chociaż opinie lekarzy nieco się różnią. Niektórzy uważają, że leki te pozwalają na zawieszenie procesu i ochronę wciąż nienaruszonych hepatocytów; inni są przekonani, że nie ma sensu ich przyjmować i należy prowadzić intensywną terapię przeciwwirusową.

Zatem zapalenie wątroby typu C należy do kategorii chorób, których identyfikacja stwarza pewne trudności. Poprawa metod diagnostycznych, a także terminowe badania profilaktyczne zmniejszą częstość występowania tej choroby. Ważne jest również zapobieganie tej chorobie. Należy uważnie unikać kontaktu z krwią, odmówić przyjmowania narkotyków, tylko wtedy choroba ta zostanie wyeliminowana. Najważniejszą rzeczą w zapobieganiu i leczeniu jest świadome nastawienie pacjenta do zdrowia.

Badanie PCR na wirusowe zapalenie wątroby typu C: rodzaje, wskazania, transkrypt

Wirusowe zapalenie wątroby typu C jest poważną chorobą, która występuje z uszkodzeniem wątroby. U osiemdziesięciu procent pacjentów staje się przewlekła. Wirus namnaża się w komórkach wątroby - hepatocytach - i powoduje ich śmierć. Martwa tkanka zostaje zastąpiona ogniskami tkanki łącznej, rozwija się zwłóknienie.

W miarę rozwoju zwłóknienia wątroba nie jest w stanie wykonywać swoich funkcji, zaczyna się marskość wątroby, która jest niebezpieczna z powodu jej powikłań: zwiększone ciśnienie w układzie żyły wrotnej, krwawienie z przewodu pokarmowego, upośledzenie krzepnięcia krwi, zmiany umysłowe z powodu uszkodzenia jąder mózgu przez toksyczne produkty.

Przyczyną choroby jest zakażenie wirusem z rodziny Flaviviridae, który należy do typu wirusów RNA. Oznacza to, że materiał genetyczny, za pomocą którego syntetyzowane są białka patogenu, jest kodowany w cząsteczce kwasu rybonukleinowego. Zakażenie następuje przez krew, seksualnie i od kobiety w ciąży do płodu. Niestety, wystarczająco dużo czasu może upłynąć między infekcją a rozpoczęciem produkcji przeciwciał - od dwóch tygodni do sześciu miesięcy. Nie pozwala to na ustalenie infekcji metodą ELISA i rozpoczęcie leczenia na wczesnym etapie.

Czym jest analiza PCR?

PCR jest metodą analizy molekularnej, która pozwala wykryć materiał genetyczny patogenu już w pierwszym tygodniu po zakażeniu za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy. Badanie ma wysoką swoistość, dokładność i pozwala nie tylko określić obecność lub nieobecność wirusa, ale także jego stężenie i genotyp.

Do badania pobierana jest krew pacjenta, w której potencjalnie może znajdować się wirusowy RNA. Startery są dodawane do krwi - sztucznie zsyntetyzowane regiony pożądanego genu o małej długości, a polimeraza RNA jest specjalnym enzymem, który wielokrotnie zwiększa ilość materiału genetycznego patogenu. Za pomocą specjalnego urządzenia przeprowadza się kilka cykli ogrzewania i chłodzenia. Następnie materiał jest analizowany i porównywany ze znanymi genami wirusa, na podstawie których wyciąga się wniosek o obecności lub braku infekcji.

Rodzaje analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

Istnieją trzy rodzaje analizy PCR:

    Analiza jakościowa PCR. Pierwszy etap badania. Pozwala zidentyfikować materiał genetyczny wirusa we krwi.

Analiza ilościowa PCR. Pozwala określić obciążenie wirusem - stężenie materiału genetycznego patogenu w jednym mililitrze krwi. Badanie to przeprowadza się przed rozpoczęciem terapii, a następnie w pierwszym, czwartym, dwunastym i (jeśli trwa długi) dwudziestym czwartym tygodniu leczenia w celu oceny jego skuteczności.

  • Genotypowanie Czynnik powodujący zapalenie wątroby typu C często i szybko mutuje. Na planecie znaleziono siedem wariantów tego genotypu wirusa. W Rosji pierwszy, drugi i trzeci typ są wspólne. Każdy z genotypów ma inną oporność na terapię, na przykład skuteczność leczenia pierwszego typu wynosi sześćdziesiąt procent, a dla drugiego i trzeciego liczba ta sięga osiemdziesięciu pięciu. W związku z tym, aby wybrać odpowiednie leki i przepisać kurs leczenia o wystarczającym czasie trwania, konieczne jest dokładne określenie, jakiego rodzaju wirus jest zainfekowany pacjentem.
  • Wskazania do analizy PCR dla zapalenia wątroby typu C

    Badanie PCR jest zalecane w następujących przypadkach:

    • kontakt z chorą osobą, w której może wystąpić zakażenie;
    • pozytywny test immunoenzymatyczny;
    • objawy marskości wątroby: zmiana wielkości wątroby, powiększenie śledziony, pojawienie się podskórnego splotu żylnego na brzuchu;
    • pojawienie się objawów uszkodzenia wątroby: ból prawego brzucha, zażółcenie skóry;
    • zwiększona aktywność ALT i AST w biochemicznej analizie krwi;
    • przed rozpoczęciem leczenia w celu określenia obciążenia wirusem;
    • do monitorowania skuteczności terapii przeciwwirusowej;
    • po leczeniu kontrolować nawrót;
    • w obecności zdiagnozowanego zapalenia wątroby typu B, aby wykluczyć mieszane uszkodzenie wątroby.

    Wyjaśnienie badań PCR na wirusowe zapalenie wątroby typu C

    Dekodowanie analizy PCR i testu immunoenzymatycznego na zapalenie wątroby typu C powinno być wykonane przez hepatologa lub specjalistę chorób zakaźnych. Analiza wyników PCR jest konieczna w połączeniu z danymi z analizy biochemicznej krwi, biopsji i ultradźwięków. Tylko wykwalifikowany lekarz będzie w stanie analizować wyniki badań i na ich podstawie przepisać właściwe leczenie.

    Dekodowanie analizy jakościowej.

    W analizowanym materiale biologicznym znaleziono materiał genetyczny patogenu. Potwierdzona infekcja.

    Zakażenie jest nieobecne lub ilość RNA patogenu jest poniżej granicy czułości.

    Dekodowanie analizy ilościowej.

    Normalna stawka dla zdrowych ludzi. Oznacza to, że badany materiał nie zawiera RNA wirusa zapalenia wątroby typu C lub jego stężenie jest poniżej progu czułości badania.

    Stężenie RNA jest poniżej zakresu ilościowego. Wyniki te są interpretowane bardzo ostrożnie, korelują je z danymi z innych badań, często ponownie badanych.

    Poziom miana wirusa w danym stężeniu jest uważany za niski. Zwykle zmniejszenie ilości wirusa oznacza, że ​​terapia jest skuteczna.

    Więcej niż 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Poziom miana wirusa w danym stężeniu jest uważany za wysoki.

    Więcej niż 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Ilość RNA jest powyżej górnej granicy zakresu kwantyfikacji. Z tym wynikiem nie można wyciągnąć wniosków na temat stopnia wiremii. Zwykle w takich przypadkach test powtarza się z rozcieńczeniem próbki krwi.

    Dekodowanie genotypowania.

    Wykryto RNA określonego genotypu

    W biomateriałie wykryto wirusa zapalenia wątroby typu C o określonym genotypie i podtypie. Wynik jest zakodowany cyframi rzymskimi i literami łacińskimi, na przykład - 1a, 2b. W sumie istnieje siedem genotypów i sześćdziesiąt siedem podtypów, ale w Rosji istnieją tylko trzy pierwsze typy.

    Wykryto RNA wirusa zapalenia wątroby typu C

    RNA znaleziono we krwi rzadkiego genotypu dla Rosji, którego nie można przypisać pierwszemu, drugiemu lub trzeciemu typowi. Potrzebnych jest więcej badań.

    Wynik ten wskazuje, że pacjent jest zdrowy lub że ilość RNA patogenu jest zbyt mała.

    Możliwe jest, że analiza PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu C jest ujemna, a test immunoenzymatyczny rozpoznaje przeciwciała przeciwko wirusowi. Oznacza to, że pacjent miał ostre zapalenie wątroby typu C i wyzdrowiał samodzielnie. Około dwudziestu przypadków zakażenia prowadzi do samoistnego powrotu do zdrowia, jeśli ciało pacjenta ma wystarczającą odporność na zakażenie.

    Chociaż PCR jest bardzo dokładna, jego wyniki mogą być zniekształcone w następujących sytuacjach:

    • krew została przetransportowana do laboratorium w nieodpowiednich warunkach, temperatura została naruszona;
    • próbka biomateriału była zanieczyszczona;
    • we krwi pozostały śladowe ilości heparyny i innych antykoagulantów;
    • Odkryto, że badacze są inhibitorami - substancjami, które spowalniają lub zatrzymują reakcję łańcuchową polimerazy.

    Zalety PCR nad innymi metodami

      Diagnoza na wczesnym etapie. PCR wykrywa materiał genetyczny czynnika sprawczego. Za pomocą analizy immunofluorescencyjnej można zidentyfikować tylko immunoglobuliny - substancje wytwarzane przez organizm w odpowiedzi na infekcję. W przypadku zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu C różnica między zakażeniem a początkiem odpowiedzi immunologicznej może wynosić kilka tygodni i miesięcy, w tym czasie test ELISA będzie nieskuteczny. PCR da odpowiedź w pierwszym tygodniu po zakażeniu.

    Niskie prawdopodobieństwo błędu. W badanym materiale określ obszar materiału genetycznego, który jest charakterystyczny tylko dla jednego rodzaju patogenów. Eliminuje to fałszywe wyniki. Gdy możliwe są błędy ELISA, ponieważ ten sam typ przeciwciała można uwolnić przeciwko różnym wirusom - takie przeciwciała są nazywane przeciwciałami krzyżowymi.

  • Wysoka czułość. PCR umożliwia wykrycie czynnika sprawczego RNA nawet w minimalnych ilościach. Umożliwia to identyfikację ukrytych infekcji.
  • Jak przygotować się do oddawania krwi do badań PCR

    Do analizy PCR zapalenia wątroby typu C zbiera się krew żylną. Zazwyczaj pobiera się dwie porcje krwi z żyły pacjenta: pierwsza jest wysyłana do PCR, a druga przez ELISA. Odbywa się to w celu dokładniejszej oceny, ile pacjent jest zainfekowany wirusem i jak walczy z nim odporność.

    Zwykle pacjent musi przestrzegać następujących zasad:

    • rano wykonuje się badanie krwi;
    • Przerwa między ostatnim posiłkiem a oddaniem krwi powinna wynosić od ośmiu do dziesięciu godzin;
    • dwa lub trzy dni przed analizą konieczne jest porzucenie smażonych i tłustych potraw oraz alkoholu;
    • przez dwadzieścia cztery godziny przed analizą pacjent powinien unikać wysiłku fizycznego: nie noś ciężarów, nie chodź na siłownię lub basen.

    Ilościowa reakcja PCR na zapalenie wątroby typu C

    Wirus zapalenia wątroby typu C może namnażać się w komórkach krwi i powodować choroby limfoproliferacyjne. Ze względu na liczne mutacje osłabia się odporność immunologiczna organizmu, pojawiają się genotypy i podtypy wirusa. Przy prawidłowym i terminowym określeniu konkretnego typu zależy skuteczność terapii przeciwwirusowej. Niebezpieczeństwo infekcji polega na tym, że choroba jest bezobjawowa. Tylko 15 procent na 100 może doświadczać nudności i wymiotów, utraty wagi i gorączki.

    Wykrywanie wirusa zapalenia wątroby typu C.

    Standardowy wskaźnik wirusowego zapalenia wątroby typu C występuje w rozmiarach od 40 do 60 nm, przy czym większość lipidów, uszkodzenie wątroby jest wynikiem ostrego lub przewlekłego przebiegu choroby. Wirusowe zapalenie wątroby typu C, a mianowicie wirus RNA z rodziny Togaviridae, jest niezwykle odporny, jest przenoszony przez transfuzję krwi lub stosowanie niesterylnych przedmiotów, niewłaściwe środki higieny itp. Analiza ilościowa pozwala na badanie krwi i identyfikację struktury genetycznej zakażonego wirusa.

    Do określenia zapalenia wątroby typu C i jego genotypów należy przeprowadzić analizę ilościową. W zależności od analizatora można określić trzy poziomy występowania wirusa RNA.

    Podtypy mogą wytwarzać różne modyfikacje, więc specyficzność i czułość analizatora musi być w stu procentach. Oprócz wykrywania choroby u pacjenta konieczne jest określenie stopnia jej nasilenia. Niektóre laboratoria nie mają wszystkich danych dotyczących dekodowania wirusów RNA, istnieje możliwość fałszywej pozytywnej odpowiedzi.

    Badania nad wirusowym zapaleniem wątroby typu C będą bardziej dokładne podczas badania tych wskaźników:

    AlAT, AsAT; Tarcza alkaliczna; LDH.

    Zwracając uwagę na wyniki tych wskaźników i ogólny stan ciała, wyświetla się wynik pokazujący stopień zakażenia, kształt i liczbę komórek zapalenia wątroby typu C we krwi. Przyczynia się to do procesu gojenia i skuteczności terapii przeciwwirusowej.

    Rodzaje analiz zapalenia wątroby typu C

    Wielowymiarowa reakcja łańcuchowa (PCR) daje wyobrażenie o liczbie cząstek DNA w analizowanych pacjentach, a jednocześnie prawidłowo identyfikuje czynnik zakaźny.

    Mogą wystąpić czynniki chorobotwórcze chorób zakaźnych. Zakażenie wątroby, takie jak wirusowe zapalenie wątroby typu C, można leczyć w naszych czasach, gdy zostanie wykryte w odpowiednim czasie. Jeśli podejrzewa się wirusa, przeprowadza się analizę PCR.

    Biorąc pod uwagę, że objawy wirusa mogą być zamaskowane przez długi czas, osoba może nie poczuć początku choroby. Ale po dokładnym badaniu w 60–70% przypadków wykrywane jest wirusowe zapalenie wątroby typu C, pierwsza analiza, którą jest ELISA, a następnie diagnostyka PCR. Analizę przeprowadza się w pewnych okresach, aby określić stadium choroby i przepisać odpowiednie leczenie. Aby się bez niego obejść, bez stosowania wszystkich tych procedur, możliwe jest szczepienie przeciwko zapaleniu wątroby.

    Analiza, w tym diagnostyka PCR, przedstawia obraz choroby, aktywność wirusa w różnych okresach rozwoju.

    Po pierwsze, istnieje analiza jakościowa, która tylko potwierdza hipotezę o zakażeniu, a następnie ilościowe określenie obciążenia wątroby. Idealnym rozwiązaniem byłby negatywny wynik dla wirusowego zapalenia wątroby typu C w materiale genetycznym pacjenta.

    Analiza jakościowa i ilościowa

    Istnieją analizy jakościowe i ilościowe. Istotą pierwszego jest to, że określa obecność infekcji we krwi. A to oznacza, że ​​wirus infekuje zdrowe komórki wątroby. Gdy u pacjenta stwierdza się przeciwciała przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C, natychmiast przeprowadza się test jakościowy. Szybkość, z jaką powinien dać wynik, „nie została wykryta we krwi”. Przy określaniu stężenia wirusa istnieje potrzeba poznania czułości systemu diagnostycznego, ponieważ osoby poddawane terapii przeciwwirusowej mogą przeprowadzić analizę. Stopień czułości analizatora nie powinien być mniejszy niż 50 IU / ml.

    Po wykryciu wirusa przeprowadza się analizę ilościową, innymi słowy, obciążenie wirusem, które określa stężenie wirusa we krwi i ciężkość choroby.

    Wirusowy RNA, który jest w pewnej ilości krwi, jest zdefiniowany jako norma z szybkością 1 ml na 1 centymetr sześcienny. Po ilościowym określeniu obciążenia wirusem możliwe jest określenie stopnia zakażenia wciąż niezakażonego środowiska. Gdy tylko stężenie wirusowego zapalenia wątroby typu C wzrośnie we krwi, konieczne jest odizolowanie od środowiska.

    Na wczesnym etapie ważne jest wykrycie stopnia stężenia zapalenia wątroby, aby określić tempo rehabilitacji. Jeśli wskaźnik wirusowego zapalenia wątroby typu C zostanie przekroczony o ponad 800 tys. IU / ml, uważa się to za zbyt wysokie, ze wzrostem do jednego miliona - krytyczne. Jeśli zakres ilościowy jest mniejszy niż 400 tysięcy IU / ml, uważa się, że zakażenie tych wokół będzie mniej prawdopodobne. Ta liczba pokazuje, że wirusowe zapalenie wątroby typu C występuje w organizmie w bardzo małych dawkach. Analiza nie była w stanie określić ilościowej wartości cząsteczek RNA wirusa, dlatego jest ona ponownie wyznaczana kilka razy dla dokładności diagnozy.

    Wyniki analizy ilościowej

    Zadaniem określenia ilości wirusa w krwi pacjenta jest identyfikacja stopnia zakażenia u innych.

    Test zapalenia wątroby typu C.

    pozwala ocenić skuteczność terapii przeciwwirusowej, poziom zakaźności i liczbę zakażonych tkanek.

    Ważne jest, aby zapobiegać postępowi choroby, podejmować środki zapobiegawcze w odpowiednim czasie, przepisywać właściwe leczenie na podstawie diagnostyki PCR. Jeśli, zgodnie z wynikami, poziom wiremii jest mniejszy niż 400 tysięcy IU / ml, to stężenie może być minimalne, co wskazuje na możliwe pełne wyzdrowienie. Normą pozytywnego wyniku jest brak infekcji.

    Wyniki analizy PCR:

    Pozytywna odpowiedź oznacza infekcję materiału biologicznego. Analiza pozwala określić dokładną liczbę zainfekowanych komórek. Negatywna odpowiedź wskazuje na brak infekcji, który jest starannie poszukiwany w organizmie.

    Metoda ilościowego oznaczania wirusowego zapalenia wątroby typu C jest dokładna i pouczająca, przeprowadzana na sprzęcie o wysokiej czułości. Rozszyfrowanie wyników analizy pozwala dowiedzieć się, czy infekcja i jej specyfika, aby zobaczyć najmniejszą liczbę zainfekowanych komórek w wysoce czułych analizatorach.

    Analiza fałszywie daje wyniki fałszywie dodatnie lub przeciwne, częściej w badaniach immunologicznych.

    Wirusowe zapalenie wątroby typu C jest jednym z najbardziej niebezpiecznych i trudnych do zdiagnozowania chorób wirusowych. W celu określenia choroby stosuje się metodę wirusowego zapalenia wątroby typu C. Jest to nowa technika high-tech, która pozwala na zbadanie materiału genetycznego pod kątem istnienia życia w najmniejszych cząstkach (cząsteczkach) i najmniejszych ilościach. Wirus zapalenia wątroby jest bardzo trwały, może żyć w środowisku przez długi czas i jest dobrze osadzony w organizmie człowieka.

    Czym jest PCR?

    Dzisiaj istnieje ogromna liczba różnych chorób. I nie mniejsza liczba metod ich określania. Ponieważ czynniki infekcyjne nauczyły się zakorzeniać w środowisku i łatwo ewoluować, do ich diagnozowania wykorzystywane są najnowsze technologie. Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) jest szybszą i dokładniejszą metodą, która ma na celu znalezienie czynnika wywołującego chorobę poprzez znaczne zwiększenie części DNA wirusa zapalenia wątroby w próbce. O nim często piszę: szukam igły w stogu siana, a następnie buduję stertę igieł.

    Rodzaje metody PCR

    Testy jakościowe pomogą określić obecność wirusa zapalenia wątroby typu C w organizmie.

    Przydzielanie jakościowej i ilościowej analizy zapalenia wątroby. Aby ustalić, czy wirus znajduje się w organizmie, oraz tych, którzy znaleźli przeciwciała przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C, należy przeprowadzić wysokiej jakości badania. Analiza dekodowania daje wynik: „pozytywny”; „Negatywny”. Negatywne znaczenie oznacza: albo osoba jest zdrowa, albo nie ma wystarczającej ilości czynników we krwi i nie można ich znaleźć. Dlatego warto po pewnym czasie przeprowadzić ponowne badanie.

    Wynik pozytywny wskazuje na istnienie infekcji. Jest to prawie zawsze dokładna wartość. Błędne wyniki zwykle zależą od czynnika ludzkiego (niewłaściwe przechowywanie lub nieprzestrzeganie zasad procedury). Gdy stawka jest, wynik jest ujemny. Przed testowaniem nie ma specjalnych zasad, po prostu weź krew z żyły.

    Jeśli zostanie znaleziony, przeprowadź analizę ilościową (obciążenie wirusem) - podaje wartości liczbowe: ile RNA wirusa zapalenia wątroby jest w tym czasie w zalecanej objętości badanego materiału. Wraz z aktywnym rozwojem zakażenia, można go wykryć po 1-2 tygodniach u zarażonej osoby. Krew jest również zwykle badana, ponieważ środki krążą w niej swobodnie.

    Cechy ilościowej analizy PCR

    Ilościowa reakcja PCR pomoże Ci wybrać najbardziej skuteczne leczenie zapalenia wątroby typu C.

    Różnica w analizie ilościowej polega na tym, że nie wszystko przechodzi. Jakościowy - określa obecność i ilościowy - pomaga potwierdzić wniosek „wirus zapalenia wątroby”, prognozę przebiegu choroby i określić przebieg leczenia. Jak skuteczna jest terapia, to liczba RNA przed i podczas leczenia. Również z jego pomocą określić mianowanie dawek leków.

    Z reguły jest produkowany przed rozpoczęciem leczenia. Głównymi wskazaniami mogą być:

    oznaczenie obciążenia wirusem i kontrola terapii przeciwwirusowej, wysokiej jakości PCR wykryło przeciwciała zapalenia wątroby typu C, stwierdzając ostre i przewlekłe wirusowe zapalenie wątroby typu C, istnienie mieszanego zapalenia wątroby, przy planowaniu leczenia, jeśli badanie jakościowe nadal stwierdza obecność choroby po dwunastym tygodniu terapii.

    Zobacz także, jakie obciążenie wirusowe w zapaleniu wątroby: niska - terapia jest przeprowadzana z powodzeniem; zwiększona - leczenie nie jest skuteczne i wymaga zmiany.

    Co jest przeprowadzane na różnych etapach choroby?

    Analiza pomoże monitorować wyniki terapii na wszystkich etapach leczenia.

    W różnych fazach choroby przeprowadza się badanie w celu dokonania przeglądu korzyści wynikających z leczenia i planowania jego trwania. Dzięki dobrym reakcjom na terapię zostaje skrócony. W przeciwnym razie, wraz z powolnym wycofywaniem wirusa, leczenie jest przedłużone. PCR na zapalenie wątroby wykonuje 1,4, 12, 24 tygodnie terapii. Gdy wskaźniki nie spadają po 12 tygodniach, dochodzą do wniosku, że terapia nie jest odpowiednia dla tego organizmu. Ta analiza jest wykorzystywana do określenia aktywności infekcji i prawdopodobieństwa jej transmisji. Na przykład podczas ciąży istnieje ryzyko zarażenia dziecka. Po terapii określ ryzyko nawrotu choroby.

    Odszyfrowywanie

    Po badaniu analiza może rozszyfrować nie liczbami, ale słowami: „poniżej zakresu pomiarowego” i „nie wykryto”. Ilościowa reakcja PCR jest bardziej wrażliwa jakościowo. Wniosek „nie wykryty” może powiedzieć, że infekcja nie została znaleziona. „Poniżej zakresu pomiarowego” - test nie znalazł wirusa, ale ma niewielką wartość. W tej sytuacji wykonaj drugie badanie.

    Obciążenie wirusowe to określenie liczby zakaźnego RNA w określonej objętości krwi (1 ml = 1 metr sześcienny ilościowo). Sformułowane w międzynarodowych pomiarach IU / ml. Oddzielne laboratoria wyznaczają kopie / ml. Różne systemy testowe mogą rozszyfrować tłumaczenie komponentów na wartości międzynarodowe na swój własny sposób. Tabela 1. Rozszyfrowanie ilościowej analizy RNA wirusa

    Diagnoza zapalenia wątroby obejmuje szereg testów w celu określenia obecności wirusa we krwi. Jednym ze sposobów wykrywania choroby jest metoda badawcza, taka jak PCR dla zapalenia wątroby typu C. Co to jest, dlaczego analiza PCR dla zapalenia wątroby jest tak samo ważna, jak jest wykonywana i dekodowana?

    Co to jest

    Reakcja łańcuchowa polimerazy lub PCR służy do diagnozowania wrzodów żołądka, zapalenia jelita grubego, zapalenia jelit. Ale jego główną zaletą jest to, że pomaga w wykrywaniu w organizmie zarówno wirusa zapalenia wątroby typu C, jak i przeciwciał, które mają zdolność nie powodowania reakcji układu odpornościowego z powodu ich zdolności do mutacji.

    Badanie i jego istota polega na stworzeniu pewnych warunków, w których zachodzi reakcja łańcuchowa RNA wirusa zapalenia wątroby. Jeśli w porównaniu z sekwencją nukleotydową wirusa zapalenia wątroby typu C, zbieg okoliczności zostanie stwierdzony, oznacza to, że we krwi znajdują się cząstki wirusa, a w wątrobie zachodzą procesy dezintegracji. Jeśli ilość wirusa jest poniżej pewnego poziomu, przeprowadzana jest negatywna diagnoza, a jeśli wyższa, dodatnia.

    Istnieją dwa rodzaje badań krwi z zastosowaniem metody PCR dla zapalenia wątroby: analiza ilościowa i analiza jakościowa.

    Ilościowa PCR, jak wspomniano powyżej, określa stężenie RNA wirusa zapalenia wątroby. Ponadto jest w stanie udzielić informacji o intensywności, z jaką rozwija się patologia i skuteczności przepisanego leczenia. Ilościowa analiza wirusowego zapalenia wątroby typu C jest niezwykle ważna, ponieważ utrwala odporność na działanie leków przeciwwirusowych i umożliwia dostosowanie terapii.

    Po przejściu przez pacjenta leczenia, PCR pomaga określić kolejność wizyt. W niektórych przypadkach potrzeba dodatkowych badań. Na przykład, jeśli poziom ALP jest zwiększony (ale nie więcej niż 2 razy w ciągu sześciu miesięcy), a transkrypcja analizy wskazuje obciążenie wirusem powyżej 105 IU / ml, pacjentowi przepisuje się biopsję. Jeśli analiza ilościowa PCR ujawni ciężkie zapalenie i zwłóknienie, pacjentowi przepisuje się kurs leczenia lekami przeciwwirusowymi.

    W sytuacjach, w których duża liczba cząstek wirusowych jest połączona z wysoką ALT, pacjent powinien być natychmiast leczony bez dodatkowych środków diagnostycznych.

    Wykonaj ten test i dowiedz się, czy masz problemy z wątrobą.

    Tylko wykwalifikowani i doświadczeni specjaliści mogą jakościowo rozszyfrować ilościową analizę krwi na zapalenie wątroby, a nowoczesne technologie pomagają to zrobić przy niskim stężeniu wirusa we krwi.

    Jakościowa analiza PCR ma na celu określenie i potwierdzenie rzeczywistej obecności wirusa w organizmie. Przeprowadza się je, gdy we krwi wykryte zostaną przeciwciała przeciwko zapaleniu wątroby. Jest to jakościowa analiza zapalenia wątroby, która gwarantuje dokładność wyniku o 100% i pozwala postawić diagnozę we wczesnych stadiach choroby, co umożliwia rozpoczęcie walki z zapaleniem wątroby już w pierwszych tygodniach po zakażeniu i zwiększa szanse całkowitego wyzdrowienia (w przypadku choroby typu B).

    Zalety PCR

    W badaniu PCR i rozszyfrowaniu badania krwi na zapalenie wątroby można również określić genotyp patogenu. W sumie istnieje 6 genotypów wirusa i duża liczba podtypów, jednak w naszym regionie powszechne stały się 1, 2 i 3 genotypy.

    Inne zalety tego typu diagnozy to:

    • wysoka dokładność uzyskanych wskaźników i niskie prawdopodobieństwo błędu w nich;
    • wysoki poziom wrażliwości na cząstki wirusowe we krwi;
    • możliwość identyfikacji kilku patogenów jednocześnie;
    • diagnoza wewnątrzkomórkowych mikroorganizmów patogennych o dużej zmienności antygenowej;
    • praca z analizą dekodowania zapalenia wątroby pozwala wykryć ukryte bieżące infekcje.

    Kto jest powołany

    Następujące kategorie osób muszą przejść analizę PCR na zapalenie wątroby:

    • kobiety w ciąży;
    • personel służby zdrowia;
    • potencjalni dawcy krwi i narządów;
    • ci, którzy mają charakterystyczne objawy choroby;
    • Osoby zakażone HIV;
    • uzależnieni;
    • rozwiązli seksualni pracownicy.

    Jak przeprowadzana jest analiza i czy trzeba się do niej przygotować

    Pobieranie krwi do PCR odbywa się z żyły. Z reguły dzieje się to rano, zanim osoba zjadła, ponieważ po zjedzeniu posiłku powinno upłynąć co najmniej 8 godzin. W skrajnych przypadkach krew może zostać pobrana do badania w ciągu dnia lub wieczorem, ale różnica czasu między analizą a spożyciem pokarmu powinna wynosić co najmniej 5 godzin.

    Czynnik ludzki może wpływać ilościowo na wyniki: ich dokładność w niektórych przypadkach zmniejsza się ze 100% do 95%, dlatego konieczne jest wcześniejsze przygotowanie się do oddawania krwi. Jakość biomateriału do analizy będzie odpowiednia, gdy pacjent przestrzega następujących zasad:

    • przed oddaniem krwi możesz pić tylko czystą wodę;
    • dwa dni przed badaniem należy porzucić spożycie smażonych i tłustych potraw, a także napojów alkoholowych;
    • dzień przed wizytą w laboratorium należy przerwać przyjmowanie leków. Jeśli nie jest to możliwe, należy powiadomić technika laboratoryjnego i lekarza prowadzącego;
    • dzień wcześniej musisz unikać stresujących sytuacji i wysiłku fizycznego;
    • badania ultrasonograficzne, rentgenowskie i instrumentalne nie powinny być przeprowadzane na krótko przed oddaniem krwi;
    • na godzinę przed analizą musisz powstrzymać się od palenia;
    • 20 minut przed oddaniem krwi, musisz się rozproszyć, uspokoić i wydech.

    Jeśli dziecko poniżej 5 roku życia przejdzie badania, rodzice powinni upewnić się, że pije przegotowaną wodę co 10 minut przez pół godziny przed przyjęciem biomateriału.

    Odszyfrowywanie otrzymanych danych

    Dekodowanie analizy można przedstawić słownie (w przypadku badania jakościowego), na przykład „nie wykryto” lub „poniżej zakresu zmian”. W pierwszym przypadku oznacza to, że infekcja nie została wykryta. W drugim - że wirus jest obecny, ale w małych ilościach. Ta sytuacja wymaga ponownego zbadania.

    Obciążenie wirusem jest określane przez ilość zakaźnego RNA i jest określane jako IU / ml lub kopie / ml.

    Normalnym wskaźnikiem (normą) ilościowej analizy zapalenia wątroby typu C jest zakres od 1,8 x 102 do 2,4 x 107 IU / ml.

    Stężenie wirusa we krwi może być:

    • niski: od 600 IU / ml do 3x10 4 / ml;
    • pożywka: od 3 x 10 4 jm / ml do 8 x 105 jm / ml;
    • wysoki: ponad 8x10 5 IU / ml.

    Ilościowa i jakościowa analiza PCR dla zapalenia wątroby pozwala określić obecność wirusa w organizmie i poziom jego stężenia. Wielowymiarowa reakcja łańcuchowa jest w stanie zdiagnozować chorobę w jej wczesnych stadiach, ale w tym celu konieczne jest, aby pacjenci jak najszybciej zwrócili się o pomoc do instytucji medycznych i ściśle przestrzegali zaleceń lekarza prowadzącego.

    Wirus zapalenia wątroby typu C może namnażać się w komórkach krwi i powodować choroby limfoproliferacyjne. Ze względu na liczne mutacje osłabia się odporność immunologiczna organizmu, pojawiają się genotypy i podtypy wirusa. Przy prawidłowym i terminowym określeniu konkretnego typu zależy skuteczność terapii przeciwwirusowej. Niebezpieczeństwo infekcji polega na tym, że choroba jest bezobjawowa. Tylko 15 procent na 100 może doświadczać nudności i wymiotów, utraty wagi i gorączki.

    Wykrywanie wirusa zapalenia wątroby typu C.

    Standardowy wskaźnik wirusowego zapalenia wątroby typu C występuje w rozmiarach od 40 do 60 nm, przy czym większość lipidów, uszkodzenie wątroby jest wynikiem ostrego lub przewlekłego przebiegu choroby. Wirusowe zapalenie wątroby typu C, a mianowicie wirus RNA z rodziny Togaviridae, jest niezwykle odporny, jest przenoszony przez transfuzję krwi lub stosowanie niesterylnych przedmiotów, niewłaściwe środki higieny itp. Analiza ilościowa pozwala na badanie krwi i identyfikację struktury genetycznej zakażonego wirusa.

    Do określenia zapalenia wątroby typu C i jego genotypów należy przeprowadzić analizę ilościową. W zależności od analizatora można określić trzy poziomy występowania wirusa RNA.

    Podtypy mogą wytwarzać różne modyfikacje, więc specyficzność i czułość analizatora musi być w stu procentach. Oprócz wykrywania choroby u pacjenta konieczne jest określenie stopnia jej nasilenia. Niektóre laboratoria nie mają wszystkich danych dotyczących dekodowania wirusów RNA, istnieje możliwość fałszywej pozytywnej odpowiedzi.

    Badania nad wirusowym zapaleniem wątroby typu C będą bardziej dokładne podczas badania tych wskaźników:

    Zwracając uwagę na wyniki tych wskaźników i ogólny stan ciała, wyświetla się wynik pokazujący stopień zakażenia, kształt i liczbę komórek zapalenia wątroby typu C we krwi. Przyczynia się to do procesu gojenia i skuteczności terapii przeciwwirusowej.

    Rodzaje analiz zapalenia wątroby typu C

    Wielowymiarowa reakcja łańcuchowa (PCR) daje wyobrażenie o liczbie cząstek DNA w analizowanych pacjentach, a jednocześnie prawidłowo identyfikuje czynnik zakaźny.

    Mogą wystąpić czynniki chorobotwórcze chorób zakaźnych. Zakażenie wątroby, takie jak wirusowe zapalenie wątroby typu C, można leczyć w naszych czasach, gdy zostanie wykryte w odpowiednim czasie. Jeśli podejrzewa się wirusa, przeprowadza się analizę PCR.

    Biorąc pod uwagę, że objawy wirusa mogą być zamaskowane przez długi czas, osoba może nie poczuć początku choroby. Ale po dokładnym badaniu w 60–70% przypadków wykrywane jest wirusowe zapalenie wątroby typu C, pierwsza analiza, którą jest ELISA, a następnie diagnostyka PCR. Analizę przeprowadza się w pewnych okresach, aby określić stadium choroby i przepisać odpowiednie leczenie. Aby się bez niego obejść, bez stosowania wszystkich tych procedur, możliwe jest szczepienie przeciwko zapaleniu wątroby.

    Analiza jakościowa i ilościowa

    Istnieją analizy jakościowe i ilościowe. Istotą pierwszego jest to, że określa obecność infekcji we krwi. A to oznacza, że ​​wirus infekuje zdrowe komórki wątroby. Gdy u pacjenta stwierdza się przeciwciała przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu C, natychmiast przeprowadza się test jakościowy. Szybkość, z jaką powinien dać wynik, „nie została wykryta we krwi”. Przy określaniu stężenia wirusa istnieje potrzeba poznania czułości systemu diagnostycznego, ponieważ osoby poddawane terapii przeciwwirusowej mogą przeprowadzić analizę. Stopień czułości analizatora nie powinien być mniejszy niż 50 IU / ml.

    Po wykryciu wirusa przeprowadza się analizę ilościową, innymi słowy, obciążenie wirusem, które określa stężenie wirusa we krwi i ciężkość choroby.

    Wirusowy RNA, który jest w pewnej ilości krwi, jest zdefiniowany jako norma z szybkością 1 ml na 1 centymetr sześcienny. Po ilościowym określeniu obciążenia wirusem możliwe jest określenie stopnia zakażenia wciąż niezakażonego środowiska. Gdy tylko stężenie wirusowego zapalenia wątroby typu C wzrośnie we krwi, konieczne jest odizolowanie od środowiska.

    Na wczesnym etapie ważne jest wykrycie stopnia stężenia zapalenia wątroby, aby określić tempo rehabilitacji. Jeśli wskaźnik wirusowego zapalenia wątroby typu C zostanie przekroczony o ponad 800 tys. IU / ml, uważa się to za zbyt wysokie, ze wzrostem do jednego miliona - krytyczne. Jeśli zakres ilościowy jest mniejszy niż 400 tysięcy IU / ml, uważa się, że zakażenie tych wokół będzie mniej prawdopodobne. Ta liczba pokazuje, że wirusowe zapalenie wątroby typu C występuje w organizmie w bardzo małych dawkach. Analiza nie była w stanie określić ilościowej wartości cząsteczek RNA wirusa, dlatego jest ona ponownie wyznaczana kilka razy dla dokładności diagnozy.

    Wyniki analizy ilościowej

    Zadaniem określenia ilości wirusa w krwi pacjenta jest identyfikacja stopnia zakażenia u innych.

    Wyniki analizy PCR:

    1. Pozytywna odpowiedź oznacza infekcję materiału biologicznego. Analiza pozwala określić dokładną liczbę zainfekowanych komórek.
    2. Negatywna odpowiedź wskazuje na brak infekcji, który jest starannie poszukiwany w organizmie.

    Metoda ilościowego oznaczania wirusowego zapalenia wątroby typu C jest dokładna i pouczająca, przeprowadzana na sprzęcie o wysokiej czułości. Rozszyfrowanie wyników analizy pozwala dowiedzieć się, czy infekcja i jej specyfika, aby zobaczyć najmniejszą liczbę zainfekowanych komórek w wysoce czułych analizatorach.

    Analiza fałszywie daje wyniki fałszywie dodatnie lub przeciwne, częściej w badaniach immunologicznych.

    Wirus zapalenia wątroby typu C jest wirusem zawierającym cząsteczkę RNA. Jest w stanie uniknąć odpowiedzi immunologicznej organizmu ze względu na jego wysoką zdolność do mutacji. Istnieje sześć głównych genotypów wirusa i wielu podtypów. W naszym regionie 1, 2 i 3 genotypy są głównie rozproszone.

    W 75–80% choroba staje się przewlekła, co powoduje zwłóknienie wątroby, stan, w którym tkanka wątroby jest zastępowana przez tkankę łączną. Zwłóknienie z kolei prowadzi do raka lub marskości. Głównym sposobem przenoszenia choroby jest krew. Jeśli dana osoba ma wskazania do badania na zapalenie wątroby typu C, otrzyma dwa podstawowe testy. Określa się przeciwciała przeciwko wirusowi, a przy ich braku uważa się, że nie ma zapalenia wątroby. Jeśli obecność przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby zostanie wykryta we krwi, przeprowadzana jest analiza PCR.

    RNA tą metodą jest oznaczany we krwi w ciągu 10–12 dni po zakażeniu i wskazuje, że wirus aktywnie replikuje się w organizmie. W tym okresie po prostu niemożliwe jest wykrycie wirusa w inny sposób, ponieważ nadal nie wytwarza on specyficznych przeciwciał, a uszkodzenie wątroby nie jest widoczne w przypadku testów biochemicznych i biopsji.

    Odmiany badań PCR

    Analiza reakcji łańcuchowej polimerazy ma pewne zalety:

    1. W tym badaniu sam wirus jest określony, a nie jego produkty metaboliczne. W tym przypadku możliwe jest określenie rodzaju patogenu.
    2. Technika ma wysoką specyficzność ze względu na fakt, że badana jest tylko pewna część DNA, prawdopodobieństwo uzyskania błędnych wyników maleje.
    3. Ma bardzo wysoką czułość, określa nawet minimalną ilość wirusa we krwi.

    Istnieją dwie główne metody badania krwi na zapalenie wątroby typu C za pomocą PCR: jakościowa i ilościowa analiza PCR. Metoda jakościowa jest używana do określenia, czy wirus jest obecny. Każdy, kto ma przeciwciała przeciwko zapaleniu wątroby, został wykryty we krwi, taka analiza jest przeprowadzana. Wynik może być tylko dwóch typów: „wykryty” i „nie wykryty”, ta druga wartość jest uważana za normę.

    Pozytywny wynik testu oznacza, że ​​fragmenty wirusa RNA zostały znalezione w próbce, co z kolei wskazuje, że osoba została zakażona zapaleniem wątroby. W przypadku wyniku negatywnego możliwe są dwie opcje: nie było infekcji lub jej stężenie jest tak niskie, że nie została wykryta przez tę technikę.

    Metoda ilościowa różni się co do istoty badań, ich zadań i wskazań. Nie wszyscy pacjenci z zapaleniem wątroby poddawani są takiej analizie. On, jak każdy inny, ma pewne cele. Stosuje się oznaczenie miana wirusa lub analizę ilościową PCR na RNA wirusa:

    • do oznaczania RNA wirusa we krwi i diagnozy „wirusowego zapalenia wątroby”;
    • przewidzieć przewlekłość zapalenia wątroby i przebieg choroby;
    • do monitorowania leczenia przeciwwirusowego i decydowania o jego przedłużeniu, zmniejszeniu lub zmianie taktyki leczenia.

    Badanie prowadzone jest w obecności takich wskazań:

    • Wirusowe zapalenie wątroby typu C wykryto w badaniu jakościowym, a przeciwciała wykryto we krwi;
    • z mieszanym zapaleniem wątroby;
    • jeśli planowana jest terapia przeciwwirusowa;
    • w trakcie i po leczeniu zapalenia wątroby typu C;
    • w obecności przewlekłego i ostrego zapalenia wątroby typu C.

    Test przeprowadza się w celu oszacowania liczby jednostek wirusa w danej objętości próbki krwi 1 cm³ lub 1 ml. Wyniki podano w liczbach. Zastosowane wskaźniki: IU / ml, co oznacza jednostkę międzynarodową na mililitr i kopie na ml, liczbę kopii RNA w 1 ml próbki. Im wyższy wskaźnik ilościowy analizy, tym większe prawdopodobieństwo przeniesienia wirusa na inną osobę.

    R-DNA jest rozgałęzioną metodą DNA. Bardziej prosta i niedroga metoda. Używany do większej liczby próbek, ma niską czułość, od 500 IU / ml. Przy takiej wrażliwości istnieje szansa, że ​​wirus nie zostanie zidentyfikowany, nawet jeśli jest obecny we krwi.

    TMA jest metodą amplifikacji transkrypcji. Ta technika wykrywa kwasy nukleinowe we krwi. Ma niski koszt i wysoką czułość, od 5-10 IU / ml. Stosunkowo nowa technika, która pozwala przyspieszyć i obniżyć koszt procesu testowania.

    Wyniki analizy ilościowej definicji wirusa RNA, przedstawione przez laboratorium, interpretuje się w następujący sposób: