Liczba leukocytów we krwi

Zasada Liczenie leukocytów podczas mikroskopii w pewnej liczbie kwadratów komory zliczającej i obliczanie ich liczby w 1 litrze krwi, z uwzględnieniem rozcieńczenia krwi i objętości komory zliczającej.

Odczynnik: 3-5% roztwór kwasu octowego, zabarwiony do barwienia jąder leukocytów kilkoma kroplami roztworu błękitu metylenowego. Rozwiązanie ma niebieski kolor, może być przechowywane przez długi czas.

Przebieg determinacji. W suchej probówce zalać 0,4 ml roztworu kwasu octowego. Z palca pobiera się 0,02 ml krwi (można użyć stabilizowanej antykoagulantem krwi żylnej). Wytrzyj końcówkę pipety, a następnie wdmuchuj krew z dna probówki, wymieszaj, ponownie wybierz i przedmuchaj mieszaninę krwi i odczynnika (pipetowanie). Oznakuj probówkę i pozostaw ją do zliczenia. Zaleca się przechowywać mieszaninę krwi z roztworem kwasu octowego nie dłużej niż 2-4 godziny.

Krew rozcieńczono w probówce kwasem octowym, dokładnie wymieszano i napełniono komorą zliczającą. Napełnioną komorę pozostawia się w pozycji poziomej na 1 minutę, aby osiąść białe krwinki. Bez zmiany położenia kamery w poziomie, umieszczają ją na stole mikroskopu i przy małym powiększeniu (okular 10 ×, obiektyw 8 ×) zliczają białe krwinki w 100 dużych kwadratach, co odpowiada 1600 małym.

Dla większej dokładności leukocyty są liczone w poprzek siatki w dużych kwadratach, nie podzielonych na małe kwadraty i paski, począwszy od lewego górnego rogu siatki. Aby uzyskać lepszy kontrast, przyciemnij pole widzenia, upuść skraplacz i zamknij otwór. Komórki znajdujące się wewnątrz kwadratu i leżące na dowolnych dwóch liniach są liczone, aby nie liczyć tej samej komórki dwukrotnie.

Obliczanie liczby leukocytów przeprowadza się według wzoru:

gdzie X oznacza liczbę leukocytów w 1 μl krwi; oraz - liczba leukocytów w 100 dużych kwadratach; 20 - rozcieńczenie krwi; 100 to liczba dużych kwadratów; 250 jest współczynnikiem konwersji na 1 μl, ponieważ objętość jednego dużego kwadratu wynosi 1/250 μl (bok kwadratu wynosi 1/5 mm, wysokość 1/10 mm).

W praktyce, aby obliczyć liczbę leukocytów w 1 μl krwi, ich liczba w 100 dużych kwadratach jest mnożona przez 50, aw 1 litrze - wynikowa wartość jest mnożona przez 106.

Uwaga Podczas liczenia leukocytów błąd jest nieunikniony w 6–8% przypadków.

1. Przy dużej liczbie normocytów we krwi obwodowej są one liczone w liczbie leukocytów (zarówno leukocytów, jak i normocytów - komórek jądrzastych). Aby prawidłowo ustalić liczbę leukocytów, z całkowitej liczby jądrzastych komórek krwi należy odjąć liczbę normocytów.
2. Pozostałe błędy są podobne do tych, które powstają przy obliczaniu liczby czerwonych krwinek w komorze zliczającej.

Liczba leukocytów

Metoda liczenia w aparacie. Pobieranie i rozcieńczanie krwi produkowanej metodą probówki. 0,4 ml płynu rozcieńczającego i 0,02 ml krwi włośniczkowej wprowadza się do probówki (najlepiej Vidalevskaya). Uzyskane rozcieńczenie uważa się praktycznie za 1:20 3-5% roztwór kwasu octowego zabarwionego błękitem metylenowym jest zwykle stosowany jako rozcieńczalnik (kwas octowy lizuje erytrocyty, błękit metylenowy barwi jądra leukocytów). Przed napełnieniem komory rurka Goryaeva z rozcieńczoną krwią jest dokładnie wstrząsana. Komora jest napełniana w taki sam sposób, jak w przypadku liczenia krwinek czerwonych.

Leukocyty są znacznie mniejsze niż erytrocyty (1-2 na duży kwadrat), dlatego dla dokładności zliczenia są dokonywane w 100 dużych kwadratach (niesklasyfikowanych). Obliczenie: 100 dużych kwadratów (1600 małych) zlicza się jako leukocyt.
Pamiętając, że objętość małego kwadratu wynosi 1/4000 mm3, a krew rozcieńcza się 20 razy, oblicza się liczbę leukocytów w 1 μl krwi: 4000 20 i dzieli się przez 1600 = a x 1/2. Praktycznie, aby uzyskać rzeczywistą zawartość leukocytów w 1 μl krwi, wystarczy podzielić na połowę liczbę uzyskaną w obliczeniu i dodać 2 zera. Średni błąd metody wynosi ± 7%.

Dokładniejsza (błąd 2-3%) i doskonała jest liczba leukocytów za pomocą urządzeń elektronicznych. Liczenie leukocytów w licznikach cząstek jest przeprowadzane zgodnie z tą samą zasadą co erytrocyty. Krew wstępną rozcieńcza się i miesza z dowolnym odczynnikiem lizującym krwinki czerwone. W autoanalizatorze „Technicon” jako taki stosuje się roztwór kwasu octowego w urządzeniach „Culter” i „Celloskop” - saponinę lub sapoglobinę, które dodaje się rozcieńczone (1: 500, 1: 700) w izotonicznym roztworze chlorku sodu (6 kropli na 20 ml hodowla).

Liczenie leukocytów we krwi wykonuje się w barwionych rozmazach krwi obwodowej.
Lepiej jest policzyć w najcieńszym punkcie blisko końca wymazu, co najmniej 200 komórek (z wyjątkiem wyraźnej leukopenii), a następnie obliczyć procentowy stosunek niektórych typów białych krwinek. Zaleca się zliczanie w tej samej kolejności: połowę komórek należy policzyć na górze, połowę na dole skoku, bez przechodzenia do samej krawędzi i środka, zygzakiem (3-4 pola widzenia wzdłuż skoku, 3-4 pola pod kątem prostym do środka skoku, następnie 3-4 pola na bok równoległy do ​​krawędzi, ponownie pod kątem prostym do góry i tak dalej na jedną stronę).

Przygotowanie rozmazów. Ostrożnie umyte i odtłuszczone szkło (jego krawędź) dotyka kropli krwi w miejscu wstrzyknięcia. Smaruj szkło szlifierskie, kładąc je pod kątem 45 ° do prowadnicy przed kroplą. Po doprowadzeniu szkła do tej kropli, czekają, aż krew rozleje się wzdłuż jego krawędzi, a następnie szybkim, łatwym ruchem wykonają szlifierkę do przodu, nie odrywając jej od obiektu, zanim wyschnie całą kroplę.

Prawidłowo wykonany rozmaz ma żółtawy kolor (cienki), nie dociera do krawędzi szkła i kończy się śladem (wąsy).

Barwienie suchych rozmazów wytworzonych po wstępnym utrwaleniu. Najlepsze utrwalenie uzyskuje się w absolutnym alkoholu metylenowym (3-5 minut) lub w mieszaninie Nikiforov o równych częściach absolutnego etanolu i eteru (30 minut).

Główne farby hematologiczne to błękit metylenowy i jego pochodna - lazur I (lazur metylenowy) i lazur II (mieszanina równych części lazuru I i błękitu metylenowego), do kwaśnej - rozpuszczalnej w wodzie żółtej eozyny.

● Malarstwo Romanovsky-Giemsa. Farba Romanovsky-Giemsa (fabrycznie) ma następujący skład: Azur II - 3 g, rozpuszczalna w wodzie żółta eozyna - 0,8 g, alkohol metylowy - 250 ml i gliceryna - 250 ml. Roboczy roztwór farby przygotowuje się w ilości 1,5-2 kropli gotowej farby na 1 ml wody destylowanej. Farbę wlewa się na rozmaz z możliwie wyższą warstwą; czas barwienia - 30-35 minut Po tym okresie wymazy wymywa się wodą i suszy na powietrzu. W tej metodzie możliwe jest dobre odróżnienie jądra, ale ziarnistość neutrofilowa cytoplazmy jest znacznie gorsza, więc jest szeroko stosowana do barwienia rozmazu krwi obwodowej.

● Połączona kolorystyka May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa według Pappenheima. Gotowy barwnik, utrwalacz May-Grunwald, który jest roztworem błękitu eozynometylenowego w alkoholu metylenowym, pipetuje się na utrwalony rozmaz przez 3 minuty. Po 3 minutach do farby pokrywającej roztwór dodaje się taką samą ilość wody destylowanej, a barwienie kontynuuje się przez kolejną 1 minutę. Następnie farba jest zmywana i rozmaz jest suszony na powietrzu. Następnie wysuszony rozmaz jest przemalowywany świeżo przygotowanym wodnym roztworem farby Romanovsky'ego przez 8-15 minut. Ta metoda jest uważana za najlepszą, szczególnie w przypadku rozmazów w punktach szpikowych.

Zwiększenie liczby leukocytów we krwi obwodowej powyżej poziomu normalnego nazywa się leukocytozą, zmniejszenie nazywa się leukopenią. Leukocytoza (leukopenia) rzadko charakteryzuje się proporcjonalnym wzrostem (zmniejszeniem) liczby wszystkich leukocytów, na przykład leukocytozy z pogrubieniem krwi. W większości przypadków występuje wzrost liczby (spadku) dowolnego typu komórek. Wzrost lub spadek liczby poszczególnych typów leukocytów we krwi może być względny lub bezwzględny, w zależności od całkowitej liczby leukocytów - normalnej, podwyższonej lub obniżonej. Zmiana liczby, stosunku poszczególnych form i morfologii leukocytów zależy od typu i zjadliwości patogenu, charakteru, przebiegu i zakresu procesu patologicznego, indywidualnej reakcji organizmu.

Metoda liczenia leukocytów w komorze Goryaeva

Białe krwinki - białe krwinki - odgrywają główną rolę w ochronie przeciwdrobnoustrojowej organizmu. Granulocyty fagocytują mikroby i niszczą je za pomocą enzymów zamkniętych w granulkach, limfocyty wytwarzają przeciwciała i zapewniają odpowiedź immunologiczną na organizm.

Metoda oznaczania metody probówki: wlać do probówki 0,4 ml roztworu Türka (płyn Türka zawiera kwas octowy, aby zniszczyć krwinki czerwone i błękit metylenowy do barwienia jąder leukocytów). Za pomocą pipety kapilarnej pobrać 0,02 ml krwi ze świeżej kropli, delikatnie przedmuchać do probówki za pomocą odczynnika i wypłukać pipetę. Dobrze wymieszać Jednocześnie rozcieńczenie krwi jest 20 razy. Kropla rozcieńczonej krwi jest zbierana na końcu okrągłego pręta szklanego i nakładana na krawędź polerowanej komory szklanej.

Zliczanie odbywa się w 100 dużych, nieprzerwanych kwadratach, złożonych przez cztery. Zastosowano niewielki wzrost.

Wyprowadzenie wzoru zliczającego numer 1.

1. 100 kwadratów zawiera 1600 małych kwadratów (16 x 100)

2. Objętość krwi powyżej małego kwadratu 1/4000 mm3

3. Rozcieńczenie krwi 20 razy

Liczba leukocytów w 1 μl krwi = przy -4000-20. = Ax 50

Na przykład: 130 leukocytów zliczono w 100 dużych kwadratach siatki Goryaev. W 1 μl krwi liczba leukocytów wynosi 130 x 50 = 6500 lub 6,5-10 3.

Aby określić zawartość leukocytów w 1 litrze krwi, liczbę leukocytów, wyrażoną w tysiącach, należy pomnożyć przez 10 9.

W naszym przykładzie liczba leukocytów w 1 litrze krwi wynosi 6,5-10 9.

194.48.155.245 © studopedia.ru nie jest autorem opublikowanych materiałów. Ale zapewnia możliwość swobodnego korzystania. Czy istnieje naruszenie praw autorskich? Napisz do nas | Opinie.

Wyłącz adBlock!
i odśwież stronę (F5)
bardzo konieczne

Liczba leukocytów we krwi

Leukocytoza może być absolutna (prawdziwa) i względna (redystrybucyjna).

Absolutną leukocytozę obserwuje się w ostrych procesach zapalnych, martwicy tkanek, ostrych zakażeniach bakteryjnych (z wyjątkiem duru brzusznego, brucelozy, tularemii itp.), Stanach alergicznych, nowotworach złośliwych (z niszczeniem tkanek), zamkniętych urazach głowy i krwotokach w mózgu, cukrzycy. śpiączka mocznicowa, wstrząs, ostra utrata krwi, jako podstawowa reakcja - z chorobą popromienną. Znaczący wzrost liczby leukocytów występuje w przypadku białaczki.

Względna (redystrybucyjna) jest konsekwencją odbioru leukocytów w przepływie krwi z narządów, które służą jej magazynowi. Występuje po jedzeniu (leukocytoza pokarmowa), gorących i zimnych kąpielach, silnych emocjach (leukocytoza wegetatywna), intensywnej pracy mięśniowej (leukocytoza miogenna) itp.

Leukopenia Leukopenia jest uważana za wskaźnik zahamowania zdolności funkcjonalnej szpiku kostnego w wyniku ekspozycji na substancje toksyczne (arsen, benzen itp.), Niektóre leki (sulfanilamidy, chloramfenikol, butadion, immuno, cyklofosfamid itp.), Wirusy (grypa, wirusowe zapalenie wątroby, odra itd.), drobnoustroje (dur brzuszny, bruceloza itp.), promieniowanie jonizujące, promieniowanie rentgenowskie i hipersplenizm (zwiększona funkcja śledziony).

Leukocytoza i leukopenia rzadko charakteryzują się proporcjonalnym wzrostem (zmniejszeniem) całkowitej liczby wszystkich typów leukocytów (na przykład leukocytozy z pogrubieniem krwi); w większości przypadków stosuje się wzrost (spadek) liczby dowolnego typu komórek, dlatego stosuje się określenia „neutrofilia”, „neutropenia”, „limfocytoza”, „limfopenia”, „eozynofilia”, „eozynopenia”, „monocytoza”, „monocytopenia”, „Basofilia”.

W ocenie klinicznej zmian liczby leukocytów dużą wagę przywiązuje się do stosunku procentowego poszczególnych postaci leukocytów, to znaczy formuły leukocytów.

Liczba krwinek leukocytów zdrowej osoby:

Kwota względna Kwota bezwzględna

Bazofile ……………………….0-1% 0-0,0650 x 109 / l

Eozynofile …………………….0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l

Neutrofile: - mielocyty............ 0% nieobecne

- dźgnięty nożem... 1-6% 0,040-0,300 x 109 / l

- segmentowane….47–72% 2,0–5,5 x 10 9 / l

Limfocyty ……………………….19-37% 1,2-3,0 x 109 / L

Monocyty ………………………….3-11% 0.09-0.6 x 109 / L

Liczenie leukocytów wykonuje się w wybarwionych rozmazach krwi obwodowej. W celu prawidłowej interpretacji wyników badania formuły leukocytów zaleca się liczyć w ilościach bezwzględnych, ale nie we względnych. Najczęstsze metody malowania rozmazów przez Romanovsky-Giemsa, Pappenheim. Po zanurzeniu zlicza się co najmniej 200 komórek, a następnie uzyskuje się stosunek procentowy pewnych typów leukocytów. Analiza leukogramu z uwzględnieniem innych parametrów krwi i obrazu klinicznego jest cenną metodą badania, pomaga w diagnostyce i określeniu rokowania choroby.

Główne przyczyny neutrofilii.

Ostre zakażenia bakteryjne - zlokalizowane i uogólnione.

Zapalenie lub martwica tkanki.

Efekty lecznicze (kortykosteroidy).

Główne przyczyny neutropenii.

Zakażenia - bakteryjne (dur brzuszny, bruceloza, tularemia, gorączka paratyfusowa) i wirusowe (zakaźne zapalenie wątroby, odra, grypa, różyczka i inne).

Działanie mielotoksyczne i tłumienie granulocytopoezy (promieniowanie jonizujące; czynniki chemiczne - benzen, anilina, DDT; działanie lecznicze - cytostatyki i leki immunosupresyjne; witamina B)₁₂-niedokrwistość z niedoboru kwasu foliowego, ostra białaczka aleukemiczna, niedokrwistość aplastyczna).

Ekspozycja na przeciwciała (formy immunologiczne) - nadwrażliwość na leki, choroby autoimmunologiczne (SLE, reumatoidalne zapalenie stawów, przewlekła białaczka limfatyczna), objawy izoimmunologiczne (choroba hemolityczna noworodka).

Redystrybucja i odkładanie w narządach - warunki wstrząsu, choroby z powiększeniem śledziony i hipersplenizmem.

Postacie dziedziczne (rodzinna łagodna przewlekła neutropenia).

Główne przyczyny eozynofilii.

Inwazje pasożytnicze (włośnica).

Przewlekłe zmiany skórne - łuszczyca, pęcherzyca, wyprysk.

Guzy (eozynofilowe warianty białaczki).

Inne choroby - fibroplastyczne zapalenie wsierdzia Lefflera, szkarłatna gorączka.

W fazie zdrowienia infekcji i chorób zapalnych (korzystny znak prognostyczny).

Przyczyny eozynopenii (aneozynofilia).

Zwiększona aktywność adrenokortykosteroidów w organizmie.

Główne przyczyny bazofilii:

Przewlekła białaczka szpikowa i erytremia.

Główne przyczyny monocytozy.

Podostre i przewlekłe zakażenia bakteryjne.

Zakażenia pasożytnicze - leiszmanioza, malaria.

Hemoblastoza - białaczka monocytowa, limfogranulomatoza, chłoniaki.

Inne stany to SLE, sarkoidoza, reumatoidalne zapalenie stawów, zakaźna monocytoza; w okresie powrotu do zdrowia po infekcjach, po opuszczeniu agranulocytozy, po splenektomii.

Zmniejszenie liczby monocytów jest ważne głównie w ocenie stosunku limfocytów-monocytów w gruźlicy płuc.

Główne przyczyny limfocytozy.

Zakażenia - ostre wirusowe (mononukleoza zakaźna, odra, różyczka, ospa wietrzna), przewlekłe bakterie (gruźlica, kiła, bruceloza), pierwotniaki (toksoplazmoza).

Hemoblastoza (białaczka limfocytowa, chłoniak).

Inne choroby - nadczynność tarczycy, choroba Addisona, witamina B₁₂-niedokrwistość z niedoboru foliowego, niedokrwistość hipo i aplastyczna

Limfocytopenia jest obserwowana w SLE, chorobie Hodgkina, rozległej gruźlicy węzłów chłonnych, w końcowej fazie niewydolności nerek, ostrej chorobie popromiennej, stanach niedoboru odporności, przyjmujących glukokortykoidy.

Wzrost lub spadek liczby określonych typów leukocytów we krwi może być względny lub bezwzględny. Jeśli tylko procent określonego rodzaju zmian w białych krwinkach, to ma miejsce względna neutrofilia, względna eozynopenia itd. Zwiększenie lub zmniejszenie bezwzględnej zawartości dowolnego typu leukocytów, to znaczy liczby tych komórek na jednostkę objętości krwi, nazywa się bezwzględną neutrofilią, bezwzględną eozynopenią itp.

Przesunięcie formuły w lewo (zwiększenie liczby młodych postaci neutrofili) jest oznaką zapalenia lub procesu martwiczego w organizmie.

Przesunięcie formuły leukocytów w prawo jest charakterystyczne dla choroby popromiennej i witaminy B₁₂-niedokrwistość z niedoboru kwasu foliowego.

Brak lub znaczące zmniejszenie liczby wszystkich typów ziarnistych leukocytów - granulocytów (neutrofili, eozynofili, bazofili) określa się terminem agranulocytoza. W zależności od mechanizmu występowania wyróżnia się mielotoksyczność (działanie promieniowania jonizującego, pobór cytostatyków) i immunologiczną (hapten i agranulocytozę autoimmunologiczną).

Leukocyty (leucocytus)

Leukocyty. Ilościowe oznaczanie leukocytów. Liczenie leukocytów za pomocą kamery Goryaeva. Ilościowa zawartość leukocytów. Leukocytoza.

Białe krwinki

Liczba leukocytów we krwi zależy zarówno od szybkości ich powstawania, jak i od ich mobilizacji ze szpiku kostnego, a także od ich wykorzystania i migracji do tkanek (do zmian chorobowych), wychwytywania przez płuca i śledzionę. Na procesy te z kolei wpływa wiele czynników fizjologicznych, a zatem liczba leukocytów we krwi osoby zdrowej podlega wahaniom: wzrasta pod koniec dnia, podczas wysiłku fizycznego, stresu emocjonalnego, spożycia pokarmów białkowych i nagłych zmian temperatury otoczenia.

Ilościowe oznaczanie leukocytów

Leukocyty są liczone za pomocą kamery Goryjewa i za pomocą automatycznych liczników.

Liczenie leukocytów za pomocą kamery Goryaeva

Dzięki metodzie in vitro pobierania krwi do liczenia leukocytów:

• Do probówki wlewa się 0,4 ml roztworu 3-5% kwasu octowego zabarwionego błękitem metylenowym. Użyj pipety kapilarnej, aby pobrać 20 μl krwi ze świeżej kropli (rozcieńczenie 20 razy), ostrożnie wdmuchuj do probówki z odczynnikiem i przepłucz pipetę. Dobrze wymieszać;
• czyste i suche szkło pokrywające jest wcierane do komory, tak aby pierścienie tęczowe tworzyły się w miejscu kontaktu;
• krew rozcieńczona w probówce, dobrze wymieszać. Koniec okrągłego szklanego pręta pobiera kroplę krwi i doprowadza ją do krawędzi wypolerowanego szkła komory;
• po napełnieniu komory pozostaje przez 1 minutę w spoczynku do sedymentacji leukocytów;
• Leukocyty są rozważane przy małym powiększeniu (obiektyw × 8 lub × 9, okular × 10 lub × 15) z przyciemnionym polem widzenia (z obniżonym skraplaczem lub zwężoną przeponą);
• dla zadowalających wyników leukocyty są liczone w 100 dużych kwadratach.

Znając objętość dużego kwadratu i stopień rozcieńczenia krwi, znajdź liczbę leukocytów w 1 μl i 1 l krwi. Strona dużego kwadratu ma 1/5 mm, powierzchnia wynosi 1/25 mm2, objętość przestrzeni powyżej tego kwadratu wynosi 1/250 mm3.

Formuła do liczenia białych krwinek:

gdzie B jest liczbą leukocytów w 100 dużych kwadratach;
P - stopień rozcieńczenia (20).

Liczba leukocytów

Norma: 4,0–9,0 × 10 9 / L

Nazywa się wzrost liczby leukocytów powyżej 9,0 × 10 9 / l
leukocytoza, spadek ich liczby poniżej 4,0 × 10 9 / l - leukopenia. Jednak nawet 3,5 × 109 w 1 l leukocytów dla wielu osób może być normą. Według literatury tacy ludzie mają zwiększoną odporność immunologiczną i są mniej podatni na zachorowania, co wydaje się być spowodowane potrzebą odpowiedzi immunologicznej, aby mieć rezerwę leukocytów w tkankach, gdzie jest 50–60 razy więcej niż w krwiobiegu. Oczywiście, u zdrowych osób z niską liczbą białych krwinek we krwi obwodowej, ich rezerwy w tkankach są odpowiednio zwiększone. Zjawisko to tłumaczy się dziedzicznym i rodzinnym charakterem lub wzrostem wpływu przywspółczulnego układu nerwowego.

Leukopenia może być funkcjonalna i organiczna.
Funkcjonalna leukopenia jest związana z rozregulowaniem powstawania krwi i jest obserwowana:

• z pewnymi infekcjami bakteryjnymi i wirusowymi (dur brzuszny, grypa, ospa, różyczka, choroba Botkina, odra);
• pod działaniem leków (sulfonamidy, środki przeciwbólowe, przeciwdrgawkowe, przeciwtarczycowe, cytostatyczne i inne leki);
• podczas pracy mięśniowej, wprowadzenie obcych białek, efektów nerwowych i temperaturowych, głód, stany hipotoniczne;
• fałszywa leukocytopenia może być związana z agregacją leukocytów podczas długotrwałego przechowywania krwi w temperaturze pokojowej (ponad 4 godziny).

Organiczna leukopenia wynikająca z aplazji szpiku kostnego i jej zastąpienia przez tkankę tłuszczową występuje, gdy:

• niedokrwistość aplastyczna;
• agranulocytoza;
• białaczka leukopeniczna;
• niektóre formy choroby Hodgkina;
• promieniowanie jonizujące;
• hipersplenizm (pierwotny i wtórny);
• choroby kolagenu.

Leukocytoza

Leukocytoza jest reakcją układu krwiotwórczego na efekty
czynniki egzogenne i endogenne. Istnieją fizjologiczne i patologiczne leukocytozy.

Leukocytoza fizjologiczna to:

• trawienny - po jedzeniu, szczególnie bogaty w białko; liczba leukocytów nie przekracza 10,0–12.0 × 109 / l i po 3-4 godzinach powraca do normy;
• ze stresem emocjonalnym (adrenalina), ciężkim wysiłkiem fizycznym, chłodzeniem, nadmiernym nasłonecznieniem (oparzenie słoneczne), podawaniem wielu hormonów (katecholamin, glikokortykosteroidów itp.), w drugiej połowie ciąży, podczas miesiączki i z powodu nierównomiernego rozmieszczenia leukocytów we krwi główny nurt.

Leukocytoza patologiczna jest podzielona na bezwzględną i względną.

Leukocytoza bezwzględna - wzrost liczby leukocytów we krwi do kilkuset tysięcy (100,0–600,0 × 10 9 / l i więcej).

• Najczęściej obserwowane w białaczce: w przewlekłej białaczce - w 98-100% przypadków, w ostrej białaczce - w 50-60%. Zmiana stosunku komórek leukocytów w szpiku kostnym i punktach krwi służy jako podstawa do diagnozy białaczki.

Obserwuje się leukocytozę względną:

• ostre procesy zapalne i zakaźne, z wyjątkiem duru brzusznego, grypy, ospy, różyczki, choroby Botkina, odry. Największa leukocytoza (do 70,0–80,0 × 109 / l) obserwowana jest w posocznicy;
• pod wpływem substancji toksycznych (trucizny owadów, endotoksyn), promieniowania jonizującego (bezpośrednio po napromieniowaniu);
• w wyniku działania kortykosteroidów, adrenaliny, histaminy, acetylocholiny i preparatów naparstnicy;
• z rozpadem tkanek (martwica), zawałem mięśnia sercowego, zakrzepicą tętnic obwodowych z rozwojem zgorzeli, oparzeniami, wysiękowym zapaleniem opłucnej, zapaleniem osierdzia, mocznicą, śpiączką wątrobową;
• znaczna utrata krwi w obrażeniach, krwawienia wewnętrzne, ginekologiczne i inne.

Wzrostowi liczby leukocytów w chorobach zakaźnych w większości przypadków towarzyszy przesunięcie formuły leukocytów w lewo

Liczba leukocytów i liczba leukocytów.

Aby policzyć leukocyty, krew rozcieńcza się w mikserach lub w probówkach. W tym celu należy użyć 3-5% roztworu kwasu octowego (w celu zniszczenia krwinek czerwonych) zabarwionego dowolnym barwnikiem anilinowym (do barwienia jąder leukocytów). Siatka zliczająca jest wypełniana w taki sam sposób, jak w przypadku liczenia krwinek czerwonych. Leukocyty są liczone w 100 dużych kwadratach. W siatce Goryaev wygodnie jest policzyć je w nieprzerwanych kwadratach (na nich jest 100). Biorąc pod uwagę rozcieńczenie krwi i objętość płynu powyżej kwadratów, oblicz stały mnożnik. Kiedy hoduje się 20 razy, wynosi 50.

Podczas pracy z probówkami wlewają do nich 0,38 ml płynu i uwalniają do niego 0,02 ml krwi. Aby obliczyć automatyczne zliczanie w probówkach, czerwone krwinki hemolizują saponiną. Normalna liczba białych krwinek wynosi 4,3 • 10 9 -11,3 • 10 9 / l lub 4300-11 300 w 1 μl krwi.

Liczba leukocytów zliczona w rozmazach barwionych.

Dobry rozmaz spełnia następujące wymagania: jest cienki, a ukształtowane elementy leżą w nim w jednej warstwie; w tym przypadku rozmaz jest żółty i półprzezroczysty. Dobry rozmaz jest jednolity, a komórki nie są uszkadzane przez rozmazywanie. Aby krew mogła równomiernie leżeć na szkle, jest ona odtłuszczana przez spalenie palnika gazowego nad płomieniem lub trzymana w mieszaninie alkoholu i eteru. Pod koniec szkła dotykają świeżo uwolnionej małej kropli krwi i rozprowadzają ją bezzwłocznie na szkle. Przed barwieniem rozmaz utrwala się przez zanurzenie w metanolu na 3 minuty, w etanolu lub jego mieszaninie z eterem przez 30 minut. Istnieje wiele innych utrwalaczy. Wacik wysuszony po utrwaleniu jest wypełniony barwnikiem.

Aby odróżnić komórki krwi (definicje formuły leukocytów), należy zastosować barwienie różnicowe. Najpopularniejszy koloryt autorstwa Romanovsky-Giemsa. Barwnik ten jest mieszaniną słabo kwaśnych (eozyn) i słabo zasadowych (lazurowych II) farb. Komórki i ich części, w zależności od reakcji medium, dostrzegają w nich jeden lub inny składnik barwnika: substancje kwasowe (bazofilowe) są zabarwione na kolor lazurowy, alkaliczny (oksyfilowy) czerwony eozynowy; Neutralny postrzega oba kolory i zmienia kolor na fioletowy.

Formuła leukocytów odnosi się do procentu poszczególnych postaci leukocytów krwi.

Uwaga: Aby obliczenia były wystarczająco dokładne, konieczne jest obejrzenie co najmniej 200 białych krwinek.

Zliczanie odbywa się za pomocą systemu zanurzeniowego. Ze względu na to, że komórki są nierównomiernie rozmieszczone w rozmazie (większe przechodzą do krawędzi), ważne jest, aby stosować się do takiej kolejności ruchu na rozmazie, w której jego krawędzie i środkowy obszar byłyby postrzegane równo. Wykorzystywana jest jedna z dwóch metod ruchu: jedna z nich przesuwa obrys od górnej krawędzi do dolnej, przesuwa 2 do 3 pól widzenia wzdłuż krawędzi, a następnie przechodzi w przeciwnym kierunku do górnej krawędzi itd. W drugiej metodzie przesuwają się od krawędzi o 5 —6 pól do środka obrysu, następnie ta sama ilość na boki, a następnie z powrotem do krawędzi, przesuń na bok kilka pól na boki i powtórz ruch, aż zostanie policzonych 50 komórek. Zobacz 4 z tych miejsc w 4 rogach rozmazu. Zliczono 200 komórek, liczbę podzielono na połowę i określono liczbę każdego rodzaju białych krwinek.

Leukocyty są elementami krwi, szybko reagującymi na różne zewnętrzne wpływy i zmiany wewnątrz ciała. Określenie całkowitej liczby leukocytów może mieć wielką wartość diagnostyczną, ponieważ ujawnia stan narządów krwiotwórczych lub ich reakcję na szkodliwe skutki. Wzrost liczby leukocytów - leukocytoza - jest wynikiem aktywacji leukopoezy, spadek ich liczby - leukopenia - może zależeć od hamowania narządów krwiotwórczych, ich wyczerpania i zwiększonego rozpadu leukocytów pod działaniem przeciwciał anty-leukocytarnych 1. Neutrofile. Najbardziej zmienną grupą leukocytów są neutrofile, których liczba wzrasta wraz z wieloma infekcjami, zatruciami i rozpadem tkanek.

Charakterystyczną cechą aktywnej neutropozy jest nie tylko wzrost całkowitej liczby neutrofili we krwi, ale także pojawienie się w niej niedojrzałych postaci: liczba komórek z pchnięciem nożyc wzrasta, pojawiają się młode neutrofile, czasem nawet mielocyty. To „odmłodzenie” składu neutrofilowego nazywa się przesunięciem leukocytów w lewo. Ochronna rola neutrofili jest określona przez ich funkcję fagocytarną, działanie bakteriobójcze i uwalnianie enzymów proteolitycznych, które promują resorpcję martwiczej tkanki i gojenie się ran.

Najczęściej zmiana regeneracyjna zachodzi w obecności jakiegokolwiek procesu zapalnego lub ogniska martwicy. Bardzo ostra zmiana na promielocyty, a nawet mieloblasty ze znaczną leukocytozą nazywana jest reakcją białaczkową. Zmniejszenie liczby neutrofili - bezwzględna neutropenia - występuje, gdy szpik kostny hamuje ekspozycję na toksyny niektórych mikroorganizmów (czynniki powodujące dur brzuszny, brucelozę itp.) I wirusy, promieniowanie jonizujące, wiele leków.

2. Limfocyty. Limfocytozę obserwuje się w okresie zdrowienia z ostrych chorób zakaźnych, z mononukleozą zakaźną, limfocytozą zakaźną, białaczką limfocytową, różyczką, brucelozą, nadczynnością tarczycy.

Limfopenia bezwzględna występuje w chorobie popromiennej, zmianach układowych układu limfatycznego: chłoniaku, mięsaku limfatycznym.

3. Eozynofile. Znajdują się one we krwi w stosunkowo niewielkich ilościach (występujących głównie w tkankach), ale ich liczba wzrasta, czasami znacznie, w procesach alergicznych (choroba posurowicza, astma oskrzelowa), inwazjach robaków i dermatoz świądowych.

W sepsie, ciężkich postaciach gruźlicy, duru brzusznego i ciężkim zatruciu obserwuje się spadek liczby eozynofili - eozynopenii - aż do ich całkowitego zaniku.

4. Bazofile. Są nośnikami ważnych mediatorów metabolizmu tkankowego („odpowiedników” krwi komórek tkanki tłuszczowej). Kiedy organizm jest uczulony, ich liczba wzrasta, a gdy alergen zostanie ponownie wprowadzony, zmniejsza się gwałtownie w wyniku ich rozpadu.

5. Monocyty. Wzrost liczby monocytów - monocytozy - jest wskaźnikiem rozwoju procesów immunologicznych. Monocyty są rozpoznawane jako analogi makrofagów tkankowych. Monocyt występuje w wielu przewlekłych chorobach (chroniosepsa, gruźlica, kiła). Monocytopenia jest czasami obserwowana w ciężkich septycznych, hipertoksycznych postaciach duru brzusznego.

Agranulocyty. Charakterystyczną cechą agranulocytów jest niesegmentowane jądro i bazofilowa (niebieska) cytoplazma.

Limfocyt jest najmniejszym rozmiarem leukocytów. Rdzeń jest okrągły, owalny lub w kształcie fasoli; zajmuje większą część celi, intensywnie zabarwiony. Cytoplazma większości limfocytów z wąskim obrzeżem otacza jądro, jest zabarwiona jasnoniebieskim kolorem i jest klarowana do jądra.

Monocyt jest największą z komórek krwi. Duży rdzeń o nieregularnym kształcie i stosunkowo jasnym kolorze. Cytoplazma ma kolor szaro-niebieski, dymny, nie jest klarowana do rdzenia

Poza tymi komórkami występuje rzadko w normalnej krwi, a komórki plazmatyczne mogą często występować w chorobach. Wyróżniają się zwartym mimośrodowo rdzeniem, często o strukturze podobnej do koła. Liczba tych komórek wzrasta wraz z pewnymi chorobami zakaźnymi, posocznicą rany i szpiczakiem mnogim.

Przy obliczaniu formuły leukocytów zwraca się uwagę nie tylko na ilościowe przesunięcia w niej, ale także na jakościowe zmiany w elementach formy. Wcześniej odnotowano zmiany zwyrodnieniowe w leukocytach. W przypadku silnego zatrucia ziarnistość granulocytów obojętnochłonnych staje się obfita, duża, intensywnie zabarwiona i nazywana toksyczną (lub toksyczną). Czasami rozmazy krwi znajdują się w rozmazach krwi, namalowanych jak substancja jądrowa leukocytów. Są to tak zwane cienie Botkina - Humprechta - pozostałości chromatyny jądrowej, wskazujące na zwiększoną kruchość leukocytów, prowadzące do ich rozpadu - leukocytoliza

99. Metody określania grupy krwi, pojęcie czynnika Rh.

1. Oznaczanie grupy krwi za pomocą standardowych surowic:

Wymagany jest następujący sprzęt:

o dwa zestawy standardowych grup hemaglutynujących surowic I (0), II (A), III (B) z dwóch różnych serii i jednej fiolki surowicy IV (AB)

o butelka z izotonicznym roztworem chlorku sodu za pomocą pipety

o czystą umytą suchą płytę

o szkiełka

o sterylne igły włóczniowe do nakłuwania ciała palca

o sterylne kulki z gazy,

Standardowe surowice do oznaczania grupy krwi według systemu ABO są produkowane z określonym oznaczeniem koloru.: I (0) - bezbarwny, II (A) - niebieski, III (B) - czerwony, IV (AB) - żółty. Surowica przechowywana w 4-10 ° C Surowica powinna być lekka i przezroczysta. Obecność płatków, osadu, zmętnienia jest oznaką nieprzydatności surowicy. Pierwsze oznaki aglutynacji powinny pojawić się nie później niż 30 sekund.

Talerz jest podzielony na 4 kwadraty kolorowym ołówkiem, a zgodnie z ruchem wskazówek zegara kwadraty I (0), II (A), III (B). Dużą kroplę surowicy z dwóch grup serii I (0), II (A), W (B) umieszcza się pipetą w odpowiednim kwadracie płytki. Podkładkę na palec traktuje się alkoholem i nakłuwa skórę igłą. Pierwsza kropla krwi jest usuwana kulą z gazy, kolejne krople w różnych częściach szkiełka są nakładane kolejno na krople surowicy i dokładnie mieszane. Kropla krwi powinna być 5-10 razy mniejsza niż kropla surowicy. Następnie potrząsając płytką dokładnie wymieszaj krew z surowicą. Wstępne wyniki ocenia się po 3 minutach, po czym dodaje się kroplę izotonicznego roztworu chlorku sodu, ponownie miesza przez wytrząsanie płytki i po 5 minutach przeprowadza się końcową ocenę reakcji aglutynacji.

Przy dodatnim teście izohemagglutynacji płatki i jądra z przylegających czerwonych krwinek nie rozchodzą się po dodaniu izotonicznego roztworu chlorku sodu i mieszaniu.

Gdy reakcja negatywna spada z serum na płytkę przezroczystą, równomiernie różową, nie zawierają płatków i ziaren.

Możliwe są następujące 4 kombinacje reakcji aglutynacji ze standardowymi surowicami grup I (0), II (A), III (B).

v Wszystkie 3 surowice w obu seriach nie ulegają aglutynacji. Badanie krwi -

Ja grupuję.

v Negatywna reakcja izohemaglutynacji w grupach P (A) w surowicy obu serii i dodatnich w grupach I (0) i III (B). Badanie krwi -

II (A) grupa.

v Reakcja izohemagglutynacji jest ujemna w surowicy grupy III (B) w obu seriach, a dodatnia w surowicy grup I (0) i II (A). Badanie krwi -

III (B) grupa.

v Grupy surowicy I (0), II (A), III (B) dają pozytywną reakcję w obu seriach. Krew należy do grupy IV (AB). Ale przed podaniem takiego wniosku konieczne jest przeprowadzenie reakcji izohemaglutynacji przy użyciu standardowej surowicy IV (AB) grupy przy użyciu tej samej procedury. Test ujemnego izohemagglutynacji pozwala ostatecznie przypisać badaną krew do grupy IV (AB).

2. Pojęcie czynnika Rh.

Inny antygen (aglutynogen) znaleziono w erytrocytach, co nazwano czynnikiem Rh. Wszyscy ludzie są podzieleni na osoby z krwią Rh-dodatnią (Rh +) i Rh-ujemną (Rh). Ustalono, że 85% ludzi w erytrocytach zawiera czynnik Rh, tj. Ich krew jest Rh-dodatnia, a 15% nie zawiera jej, tj. Krew tych ludzi jest Rh-ujemna. Dla czynnika Rh (antygen Rh) zazwyczaj nie ma we krwi aglutyniny anty-Rh (gotowe przeciwciała). Takie przeciwciała pojawiają się w surowicy krwi tylko w wyniku immunizacji osoby z krwią Rh ujemną z dodatnimi krwinkami czerwonymi. Taka immunizacja występuje z powodu powtarzających się transfuzji krwi Rh-dodatniej do biorcy Rh-ujemnego lub podczas ciąży kobiety z Rh-ujemną Rh-dodatnią krwią. W ten sposób ludzie stają się uczuleni: kiedy są przetaczani krwią Rh-dodatnią, pojawia się poważne powikłanie - wstrząs transfuzyjny.

Zliczanie liczby leukocytów i płytek krwi

Czynniki wpływające na poprawność badania białych krwinek

- długie przechowywanie krwi w temperaturze pokojowej

Normy zawartości leukocytów we krwi

Wiek Liczba leukocytów

- 1 dzień 11,6 - 22,0

- 1 tydzień 8.1. - 14.3

- 1 miesiąc 7.6 - 12.4

- Dorośli 4,0 - 9,0

Metody określania liczby leukocytów we krwi.

- Zliczanie liczby leukocytów w komorze zliczającej

- Zliczanie leukocytów w analizatorach hematologicznych

Określanie liczby leukocytów w komorze zliczającej.

- Liczenie leukocytów pod mikroskopem przeprowadza się po lizie czerwonych krwinek w 100 dużych kwadratach siatki zliczającej i przeliczonej na 1 litr krwi, w oparciu o objętość kwadratów i rozcieńczenie krwi. Liczbę leukocytów należy wykonać w ciągu 2-4 godzin po pobraniu krwi.

- Jeśli w krwi obwodowej znajdują się jądrzaste krwinki czerwone, nie są one lizowane i liczone razem z leukocytami. W tym przypadku, aby określić prawdziwą liczbę leukocytów, liczbę komórek w czerwonym rzędzie odejmuje się od całkowitej liczby zliczonych komórek.

- Na przykład: Całkowita liczba leukocytów w obliczeniach w komorze (lub analizatorze) -45x109 / l. Przy obliczaniu formuły leukocytów stwierdzono, że 50 erytroblastów (normoblastów) jest obecnych na 100 leukocytów.

Obliczamy prawdziwą liczbę leukocytów we krwi:

150 ogniw - 45 x 109 / l

100 komórek (leukocytów) - X

X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l

Zatem prawdziwa liczba leukocytów we krwi wynosi 30 x 109 / l.

Główne źródła błędów w obliczaniu leukocytów w komorze:

- Nieprawidłowy stosunek objętości krwi i kwasu octowego do probówki.

- Niepoprawnie przygotowany roztwór kwasu octowego (w stężeniu powyżej 5%, niektóre leukocyty mogą ulegać lizie, co doprowadzi do niedoszacowania wyniku).

- Przedłużona ekspozycja próbki w temperaturze powyżej 28 ° C, która może przyspieszyć lizę leukocytów w próbce i prowadzić do niedoszacowania wyniku.

- Nieprawidłowe wypełnienie komory Goryaev. Podobnie jak w przypadku obliczania czerwonych krwinek, aparat należy pozostawić na 1 minutę, aby ustabilizować komórki.

- Kamera Goryjewa nie była wystarczająco umyta po poprzedniej definicji. Leukocyty pozostające w komorze mogą przeceniać wyniki analizy.

Metody liczenia płytek

- w komorze liczenia

Każda grupa metod ma zalety i wady.

- Zliczanie płytek w komorze jest wystarczająco dokładne, nie wymaga obliczania liczby czerwonych krwinek. Z drugiej strony, ta metoda jest bardziej pracochłonna, ponieważ płytki w postaci natywnej są reprezentowane przez małe i słabo skontrastowane elementy. Wadą tej metody jest zliczanie płytek krwi w najbliższych godzinach po pobraniu krwi.

- Określenie liczby płytek krwi w rozmazach krwi jest znacznie gorsze pod względem dokładności względem metody komory lub automatycznych liczników. Błędy w liczeniu rozmazów krwi mogą wynikać ze złej jakości wymazu i związanego z nim nierównomiernego rozkładu płytek krwi, niedokładnego określenia liczby czerwonych krwinek. Znaczącą wadą tej metody jest konieczność jednoczesnego liczenia płytek krwi i czerwonych krwinek we krwi. Zaletą tego jest możliwość badania płytek krwi w dowolnym momencie, niezależnie od czasu pobrania krwi.

- Metoda oznaczania płytek krwi za pomocą analizatora hematologicznego pozwala dokładnie określić liczbę płytek krwi, ich średnią objętość i rozkład objętości.

Zunifikowana metoda zliczania liczby leukocytów krwi w komorze zliczającej;

Metody liczenia liczby leukocytów we krwi

Zunifikowane 2 metody określania liczby leukocytów we krwi:

- w komorze zliczającej;

- przy użyciu analizatorów hematologicznych.

Zasada: Leukocyty zlicza się pod mikroskopem w określonej objętości komory zliczającej przy stałym rozcieńczeniu krwi po zniszczeniu krwinek czerwonych.

Odczynnik: 3-5% roztwór kwasu octowego, zabarwiony wodnym roztworem błękitu metylenowego w celu wybarwienia jąder leukocytów i ułatwienia ich zliczania. Rozwiązanie jest koloru niebieskiego, stabilne podczas przechowywania.

Wyposażenie specjalne: mikroskop, komora licząca Goryaeva.

Przebieg determinacji. Używając pipety pomiarowej lub automatycznego dozownika, dokładnie 0,4 ml roztworu kwasu octowego wlewa się do probówki z aglutynacją i do niej dodaje się 0,02 ml (kapilara Sali) krwi. Przepłucz kapilarę kilkakrotnie roztworem kwasu i wymieszaj zawartość probówki. Powoduje to rozcieńczenie krwi 20 razy. Pozostawić do zliczenia, ale nie więcej niż 2-4 godziny po pobraniu krwi. Komora Goryjewa jest przygotowana do pracy, wycierając szklaną pokrywę, aby pojawiły się pierścienie tęczy. Jeszcze raz dokładnie wstrząśnij zawartość probówki i wypełnij komorę Goryaev tą mieszaniną za pomocą pipety Pasteura lub szklanego pręta ze stopionym końcem. Pozostaw wypełnioną komorę zliczającą na 1 minutę w pozycji poziomej w celu sedymentacji leukocytów. Leukocyty zlicza się w 100 dużych, nieskreślonych kwadratach komory zliczającej w warunkach: skraplacz jest obniżony, okular 10x lub 15x, soczewka 8x. Liczenie rozpoczyna się od lewego górnego rogu siatki kamery Goryaev. Podczas liczenia leukocytów postępują zgodnie z zasadą: wszystkie komórki wewnątrz kwadratu i na liniach demarkacyjnych są zliczane, jeśli przeważnie wchodzą do wnętrza kwadratu. Komórki przecięte linią podziału dokładnie na pół, są liczone tylko na dwóch bokach kwadratu (na przykład lewej i górnej).

Obliczanie Przy obliczaniu liczby leukocytów w 1 μl krwi użyj wzoru:

- liczba leukocytów w 1 mkl krwi;

a - liczba leukocytów, obliczona w 100 dużych kwadratach;

4000 - współczynnik konwersji objętości do 1 µl, w oparciu o objętość małego kwadratu, który wynosi µl;

1600 - liczba policzonych małych kwadratów;

20 - rozcieńczenie krwi.

Aby przeliczyć liczbę leukocytów w jednostkach SI (w 1 l krwi), otrzymaną liczbę mnoży się przez 10 6.

Praktycznie do określenia zawartości leukocytów w 1 l krwi, liczba leukocytów, obliczona w 100 dużych kwadratach komory zliczającej, jest mnożona przez 50, podzielona przez 1000 (to znaczy, przenoszona do przecinka przez 3 znaki w lewo) i mnożona przez 10 9.

Metody liczenia leukocytów w komorze Goryaeva, normy wskaźników i odchylenia

Komora Goryaeva jest urządzeniem do pomiaru liczby komórek i cząstek w pewnej objętości cieczy (krew, mocz), składającej się ze specjalnego grubego przedmiotu i szklanej pokrywy.

Slajd szklany ma zagłębiony obszar pośrodku, na który nakłada się siatkę 225 dużych kwadratów. Z tych kwadratów 25 jest równomiernie podzielonych na 16 mniejszych kwadratów. Ze względu na tę objętość siatki obliczenia są wykonywane dokładniej niż w innych ręcznych urządzeniach zliczających.

Usługa aparatu

Po użyciu przyrządu szkiełko jest dezynfekowane przez zanurzenie w 4% roztworze formaliny na godzinę lub w 70% roztworze etanolu przez pół godziny. Następnie komorę dokładnie przemywa się wodą destylowaną. Nadmiar płynu usuwa się miękką szmatką. Warto zwrócić uwagę na fakt, że aparatu nie można wycierać bawełnianym wacikiem z powodu przylegania do niego włókien. Schowane szkło w suchym miejscu.

Podczas korzystania z kamery obliczane są PE, które znajdują się wewnątrz kwadratu siatki i na górnej i lewej linii obwodu. W tym przypadku cząstki, które dotykają prawej i dolnej linii obwodu podczas obliczania tej komórki, nie są uwzględniane.

Oznaczanie leukocytów we krwi

Metoda liczenia leukocytów

Obliczenie liczby leukocytów rozpoczyna się od rozcieńczenia krwi w 3-5% roztworze kwasu etanowego z błękitem metylowym 20 razy. Materiał roboczy przed użyciem wytrzeć do sucha gazą.

Szkło okładkowe należy wycierać przed pojawieniem się kolorowych pierścieni Newtona. Następnie komora jest wypełniana rozcieńczoną krwią, podczas gdy pierwsze dwie krople są uwalniane na bibułę filtracyjną. Ciecz wchodzi do komory z powodu właściwości kapilarnych wody. Ważne jest, aby podczas napełniania nic nie wpadało do rowków. W takim przypadku płyn jest delikatnie usuwany za pomocą bibuły filtracyjnej. Następnie pozostaw siatkę na minutę, czekając, aż FE zatrzyma swój ruch.

Liczba białych krwinek jest przeprowadzana w obrębie stu dużych kwadratów przy małym powiększeniu, to znaczy z okularem 10x i obiektywem 8x, zgodnie z zasadą Egorova. Wynikowa postać jest używana w formule.

X = (n × 250 × 20) / 100 lub X = n × 50

X - liczba leukocytów.

n jest liczbą uzyskaną przez zliczenie w komorze.

Określa się liczbę leukocytów, biorąc pod uwagę liczbę dużych kwadratów siatki - 100 i rozcieńczenie krwi - 20.

Jak liczy się leukocyty

Szybkość i nieprawidłowości leukocytów

Szybkość leukocytów u ludzi wynosi 4,0 - 9,0 × 10⁹ / l. Lub, inaczej, około 6000 białych krwinek znajduje się w 1 mm sześciennej krwi.

Zewnętrzne czynniki fizjologiczne mogą wpływać na odchylenia od normy:

• spożycie żywności przed oddaniem krwi;
• stres;
• ciąża lub miesiączka u kobiet;
• hipotermia lub przegrzanie;
• świetny wysiłek fizyczny przed badaniem.

Jeśli liczba białych krwinek przekracza 9,0 × 10⁹ / l (leukocyty są podwyższone), stan ten nazywany jest leukocytozą. Podobny obraz można zaobserwować w przypadku złośliwych chorób krwi, infekcji, uszkodzeń radiacyjnych i zatruć.

Leki mogą również zwiększać liczbę leukocytów. Martwica tkanek, silne krwawienie, w tym w wyniku operacji, śpiączka nerkowa, choroba serca - wszystko to może prowadzić do leukocytozy.

Spadek liczby leukocytów poniżej 3,9 × 10⁹ / l nazywa się leukopenią. Jednak u niektórych osób ustalona liczba leukocytów jest ustalona na 3,5 × 10⁹ / l. Uważa się, że tacy ludzie utrzymują rezerwę tych komórek w tkankach 50 razy więcej niż we krwi. Istnieje również leukopenia czynnościowa po podaniu środków przeciwbólowych, sulfonamidów i innych leków, po długiej pracy mięśniowej, w wyniku infekcji i wirusów (dur brzuszny, grypa i odra).

Formuła leukocytów

Wszystkie typy leukocytów stanowią formułę leukocytów. Na nim możesz zidentyfikować pewne patologie. Normy formuły różnią się w zależności od wieku i okresu życia danej osoby. Zmiana jest wyraźnie widoczna u kobiet w czasie ciąży lub po porodzie.

Stosuje się różne metody do obliczania stosunku typów tych komórek, ale wszystkie są związane z faktem, że cięższe komórki (na przykład bazofile) znajdują się bliżej krawędzi rozmazu, a limfocyty, podobnie jak komórki świetlne, pozostają w środku.

• Metoda Filipchenko. W tej metodzie obliczenia odbywają się wzdłuż poprzecznej prostej linii od jednego końca do drugiego. Obrys jest podzielony psychicznie na trzy części.
• Metoda szylingowa. Leukocyty zliczane są w czterech obszarach wymazu.

Uzyskane dane są zapisywane w tabeli. Indywidualnie liczbę każdego rodzaju białych krwinek oblicza się według wzorów. Zaznaczył te elementy, które pojawiły się w widoku. Wynik jest utrzymywany do momentu, aż suma wszystkich zliczonych komórek wynosi 100.

Metody liczenia leukocytów w moczu

W moczu oblicza się liczbę leukocytów w komórce Goryaeva Nechiporenko. Ta analiza jest potrzebna do monitorowania choroby nerek. Okresowe badanie moczu pomaga monitorować poprawność leczenia i skuteczność przepisanej terapii.

Odbiór moczu

W badaniu jest tylko pierwszy poranny mocz w środku oddawania moczu. Ważne jest, aby pacjent przestrzegał podstawowych zasad zbierania tego biomateriału. Specjalne dodatkowe szkolenie dla badania nie jest wymagane.

Metoda obliczeniowa

10 ml świeżo zebranego moczu odwirowuje się przez trzy minuty z prędkością 2,5 tys. Obrotów na minutę. Wcześniej konieczne jest zapewnienie, że mocz, aby uniknąć częściowego rozpadu komórek, ma słabo kwaśną reakcję.

Używając pipety z wąskim, narysowanym końcem, usuń górną warstwę. In vitro pozostawić od 0,5 ml moczu do 1 ml, w zależności od objętości osadu.

Osad delikatnie miesza się z supernatantem. Powstały roztwór jest używany do wypełnienia komory zliczającej Goryaev według podobnej zasady, która jest używana przy obliczaniu PV krwi. Aparat pozostaje sam przez 3 do 5 minut.

Białe krwinki muszą być liczone w dużych kwadratach na całej siatce z okularem 7x i soczewką 40x.

Wynikowa postać jest używana we wzorze:

X = (a / 0,9) × (1000 / V)

X - liczba leukocytów w 1 ml moczu.

a - obliczona ilość podzielona przez objętość komory w 1 μl osadu moczu.

v - Ilość moczu pobrana do badania.

1000 - ilość osadu.

To ważne! Norma leukocytów: w 1 ml moczu nie więcej niż 2 × 10 3 białych krwinek.

Liczba leukocytów we krwi

Personel laboratoryjny do wykrywania morfologii krwi leukocytów najczęściej korzysta z komory Goryaeva. Zliczanie leukocytów w komorze Goryaeva jest mniej dokładną metodą niż oznaczanie leukocytów za pomocą urządzeń elektronicznych. Wielkość błędu wynosi ± 7%.

Jak się liczy

1. Do rurki wlać 0,4 mililitra płynu rozcieńczającego, a także 0,02 mililitra krwi włośniczkowej. Gotową hodowlę uważa się za równą 1:20.
2. Jako płyn rozcieńczający zazwyczaj stosuje się 3 lub 5% roztwór kwasu octowego. Jest wstępnie zabarwiony błękitem metylenowym, który przez reakcję barwi jądra leukocytów.
3. Przed napełnieniem komory rurka Goryjewa jest potrząsana tak dokładnie, jak to możliwe. Napełnianie aparatu jest takie samo, jak w przypadku liczenia czerwonych krwinek.

Funkcje obliczeniowe

Dzięki liczbie leukocytów znacznie niższej od krwinek czerwonych, z tego powodu obliczenia wykonuje się w 100 dużych kwadratach. W 100 kwadratach obliczono liczbę leukocytów.

Przy objętości małego kwadratu wynoszącej 14 000 milimetrów sześciennych i 20-krotnym rozcieńczeniu krwi liczbę leukocytów oblicza się w następujący sposób: 4000 x 20, a następnie dzieli przez 1600. Okazuje się, że 1/2 x a.

Aby uzyskać liczbę białych krwinek w 1 µl, obliczoną liczbę należy podzielić przez 2 i dodać dwa kolejne zera.

Odchylenie leukocytów od poziomu wskazuje na leukocytozę i leukopenię i wymaga natychmiastowego szczegółowego badania, ponieważ istnieje wysokie prawdopodobieństwo wystąpienia gruźlicy, zapalenia płuc, posocznicy, duru brzusznego, choroby popromiennej.